| pcDNA3．1^＋-HIF-1α载体的构建和初步表达鉴定 |
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| 引用本文： | 傅锐斌,吴平生,戴铁英,赖文岩,邱建.pcDNA3．1^＋-HIF-1α载体的构建和初步表达鉴定[J].第一军医大学学报,2003,23(11):1134-1136. |
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| 作者姓名： | 傅锐斌 吴平生 戴铁英 赖文岩 邱建 |
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| 作者单位： | [1]第一军医大学南方医院心内科，广东广州510515 [2]广州军区广州总医院心内科，广东广州510010 |
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| 摘 要： | 目的 克隆和构建带人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因真核表达载体pcDNA3-1^ -HIF-1α。方法 以大肠癌细胞株HT29的总RNA为模板，进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)，获得HIF-1α的cDNA，克隆入T载体，测序证实后克隆入真核表达载体pcDNA3．1^ ，酶切鉴定重组子。将构建好的pcDNA3．1^ -HIF-1α用脂质体法转入HEK293细胞，RT-PCR鉴定重组质粒的表达。结果 扩增出HIF-1αcDNA全长，测序结果与Genbank记载完全一致，成功克隆入真核表达载体pcDNA3．1^ ；建立了稳定的细胞株HEK293／pcDNA3．1^ -HIF-1α。结论 成功克隆和构建带人HIF-1α基因真核表达载体pcDNA3．1^ -HIF-1α并证明其能在真核细胞内表达。
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| 关 键 词： | 低氧诱导因子-1α pcDNA3．1^＋-HIF-1α 真核表达载体 逆转录-聚合酶链反应 |
Construction and expression analysis of recombinant vector pcDNA3.1+-HIF-1alpha] |
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| Rui-bin Fu,Ping-sheng Wu,Tie-ying Dai,Wen-yan Lai,Jian Qiu.Construction and expression analysis of recombinant vector pcDNA3.1+-HIF-1alpha][J].Journal of First Military Medical University,2003,23(11):1134-1136. |
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| Authors: | Rui-bin Fu Ping-sheng Wu Tie-ying Dai Wen-yan Lai Jian Qiu |
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| Institution: | Department of Cardiology, Nanfang Hospital, First Military Medical University, Guangzhou 510515, China. furb7@sohu.com |
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