反义寡脱氧核苷酸对耻垢分枝杆菌抑制作用的研究

目的研究反义寡脱氧核苷酸对耻垢分枝杆菌生长的抑制作用，探讨其潜在的抗结核作用。方法在7H9培养基中接种5×10^5耻垢分枝杆菌MC^2 155，同时加入20μmol／L针对结核分枝杆菌中必须基因RV3806c在耻垢分枝杆菌中的同源基因MSMEG_6401的反义寡脱氧核苷酸。以耻垢分枝杆菌MC^2 155单独培养作为对照。观察和绘制细菌生长曲线；测定细胞膜MSMEG_6401编码的磷酸核糖转移酶的生物活性；应用高压气相色谱测定耻垢分枝杆菌细胞壁中糖的含量。结果与对照组相比，试验组耻垢分枝杆菌增殖速度平均降低0.45 OD（P〈0.01）；CFU计数平均延缓0．67Log；在应用等量的膜蛋白的情况下，实验组磷酸核糖转移酶的生物活性降低约40％，试验组和对照组细菌反应细胞壁的糖含量的指标甘露糖-半乳糖，阿拉伯糖比率没有明显差异（2组实验组分别为63％和69．4％；2组对照组分别为66．6％和69．1％）。结论针对MSMEG_6401的反义寡脱氧核苷酸对耻垢分枝杆菌的增殖有一定程度的抑制作用，推测反义寡脱氧核苷酸技术有一定抗结核价值；结核分枝杆菌的RV3806c基因或者是其编码产物可能是一个好的抗结核药物作用靶位。