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MDA-7基因的腺病毒载体构建及对肿瘤细胞凋亡的影响
引用本文:王艳,浦颖艳,方琳,孙丽君,胡晓翠,邱红,苏长青,曹祥荣,江淑芳. MDA-7基因的腺病毒载体构建及对肿瘤细胞凋亡的影响[J]. 江苏大学学报(医学版), 2008, 18(3): 205-208
作者姓名:王艳  浦颖艳  方琳  孙丽君  胡晓翠  邱红  苏长青  曹祥荣  江淑芳
作者单位:江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏,镇江,212013;南京师范大学生命科学学院,江苏,南京,210046;中国人民解放军第八一医院检验科,江苏,南京,210002;江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏,镇江,212013;中国人民解放军第八一医院检验科,江苏,南京,210002
摘    要:目的:构建一种端粒酶启动子调控目的基因MDA-7/hIL24表达的复制缺陷型腺病毒,并初步探索其抗肿瘤活性。方法:通过基因操作技术将启动子(hTERTp) 目的基因(MDA-7)插入到5型腺病毒E1A区域,构建复制缺陷型腺病毒AdTP-mda7;同时构建对照病毒AdTP-EGFP。TCID50法测定病毒滴度。应用蛋白质印迹法检测MDA-7在肿瘤细胞株中的表达状态;通过结晶紫染色实验检测两种病毒对肿瘤细胞的杀伤差异。结果:成功构建携带目的基因的腺病毒载体,PCR鉴定正确;蛋白质印迹结果表明MDA-7选择性地在多种肿瘤细胞株中表达,诱导肿瘤细胞凋亡,如A549,SGC-7901等,在以相同MOI值感染原代成纤维细胞时,原代细胞中没有检测到MDA-7表达;结晶紫染色试验结果表明AdTP-mda7对肿瘤细胞株的杀伤能力明显高于对照病毒AdTP-EGFP。结论:成功构建复制缺陷型腺病毒AdTP-mda7,并证实MDA-7蛋白在肿瘤细胞中过表达诱导多种肿瘤细胞株发生凋亡。

关 键 词:复制缺陷型腺病毒  端粒酶启动子  肿瘤基因治疗
文章编号:1671-7783(2008)03-0205-04
修稿时间:2008-03-08

Construction of tumor-specific proliferation-deficient adenovirus vector and its primary study on selective expression in tumor cells
WANG Yan,PU Ying-yan,FANG Lin,SUN Li-jun,HU Xiao-cui,QIU Hong,SU Chang-qing,CAO Xiang-rong,JIANG Shu-fang. Construction of tumor-specific proliferation-deficient adenovirus vector and its primary study on selective expression in tumor cells[J]. Journal of Jiangsu University Medicine Edition, 2008, 18(3): 205-208
Authors:WANG Yan  PU Ying-yan  FANG Lin  SUN Li-jun  HU Xiao-cui  QIU Hong  SU Chang-qing  CAO Xiang-rong  JIANG Shu-fang
Abstract:
Keywords:
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