| 重组人α-半乳糖苷酶A在巴氏毕赤酵母中的表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 徐莉娟,高红伟,季守平,宫锋,章扬培.重组人α-半乳糖苷酶A在巴氏毕赤酵母中的表达及鉴定[J].军事医学科学院院刊,2006,30(6):544-547. |
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| 作者姓名： | 徐莉娟 高红伟 季守平 宫锋 章扬培 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院野战输血研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的：克隆人α-半乳糖苷酶A（α-GalA）cDNA，并在毕赤酵母中表达重组的人α-GalA。方法：利用RT-PCR方法从人肝癌细胞中克隆人α-半乳糖苷酶AcDNA并构建到可用甲醇诱导的分泌型巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαA中。将重组质粒导入毕赤酵母并用Zeion抗生素筛选转化细胞。在甲醇诱导后。利用SDS-PAGE、Western印迹及酶活测定方法在酵母上清中鉴定重组的人α-GalA。结果：获得人α-GalA cDNA，构建酵母表达质粒pHGCZα-A，将重组表达载体导入到酵母细胞，并在上清中检测到人α-GalA蛋白。结论：获得了人α-GalA cDNA及具有生物活性的重组人α-GalA，为临床应用于法布莱氏病的治疗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人α-半乳糖苷酶A 毕赤酵母 法布莱氏病 |
| 文章编号： | 1000-5501（2006）06-0544-04 |
| 收稿时间： | 2006-06-07 |
| 修稿时间： | 2006-06-07 |
Expression and identification of recombinant human alpha-galactosidase A in Pichia pastoris |
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| XU Li-Juan,GAO Hong-Wei,JI Shou-Ping,GONG Feng,ZHANG Yang-Pei.Expression and identification of recombinant human alpha-galactosidase A in Pichia pastoris[J].Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences,2006,30(6):544-547. |
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| Authors: | XU Li-Juan GAO Hong-Wei JI Shou-Ping GONG Feng ZHANG Yang-Pei |
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| Institution: | Institute of Transfusion Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human alpha-galactosidaseA Pichia Fabry disease |
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