益气活血法对大鼠局灶性脑缺血缝隙连接蛋白表达的影响

目的:观察黄芪注射液、川芎嗪注射液合用对气虚血瘀证大鼠局灶性脑缺血模型星型胶质细胞及神经元缝隙连接蛋白(Cx)43、32表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠,随机分为空白对照组(n=10),模型组(n=20),黄芪注射液+川芎嗪注射液组(n=20),川芎嗪注射液组(n=20)。多因素复合制作气虚血瘀中医症候模型,颈外动脉插入线栓法手术制备大鼠局灶性脑缺血模型。黄芪注射液、川芎嗪注射液分别按7.2g/kg、18.0mg/kg剂量于术前30min,术后12h,24h尾静脉注射,模型组尾静脉注射等量生理盐水。模型组、黄芪+川芎嗪组、川芎嗪单用组在术后12h,24h随机选取10只大鼠检测。术前、术后、治疗后采用Longa及Bederson的5分制法进行神经行为学评分。免疫组织化学方法检测Cx43、Cx32蛋白表达;RT-PCR及western-blot技术分析Cx43mRNA、Cx32mRNA表达情况。结果:在蛋白及mRNA表达水平上,模型组较空白对照组显著升高,12h达峰值(P<0.01)、24h逐渐下降。与模型组比较,黄芪+川芎嗪组及川芎嗪组12h、24h时间点表达均不同程度降低,于12h降低最为显著(P<0.05)。与川芎嗪组比较,黄芪+川芎嗪组12h、24h时间点表达下降更为显著(P<0.05)。大鼠神经行为学评分结果:空白对照组无神经缺损症状,评分为0分。与空白对照组比较,模型组12h评分达峰值,24h评分下降,与Cx43、Cx32蛋白及mRNA表达一致。与模型组比较,黄芪+川芎嗪组及川芎嗪组12h,24h评分均下降(P<0.05)。结论:黄芪注射液、川芎嗪注射液合用可改善气虚血瘀证大鼠局灶性脑缺血后神经功能缺损的症状,并可下调大鼠局灶性脑缺血后星型胶质细胞Cx43及神经元Cx32的高表达。