| hErmin160蛋白的表达及其多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 徐清,赵玮钦,王涛,关路媛,陈南春,张斌. hErmin160蛋白的表达及其多克隆抗体的制备[J]. 医学争鸣, 2008, 29(20): 1892-1895 |
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| 作者姓名： | 徐清 赵玮钦 王涛 关路媛 陈南春 张斌 |
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| 作者单位： | 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西西安710033 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，解放军医药卫生科研项目 |
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| 摘 要： | 目的:对hErmin氨基端160个氨基酸(hErmin160)蛋白进行表达、鉴定和纯化并制备其多克隆抗体,为研究hEr-min功能奠定基础.方法:PCR扩增编码hErmin160的核苷酸序列,克隆入原核表达载体pET41-b( ),转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,诱导表达hErmin160融合蛋白,表达产物用SDS-PAGE和Western Blot进行鉴定,经镍柱纯化后,免疫家兔,制备其多克隆抗体,并对免疫后抗血清进行亲和纯化,用Western-Blot检测抗体纯化的效果.结果:测序证实获得hEr-min氨基端前160个氨基酸的编码序列;SDS-PAGE分析表明,表达产物的相对分子质量为51 ku,与理论值相符;灰度扫描分析hErmin160融合蛋白的表达量占菌体蛋白总量的10%,纯化产物纯度达92%;Western Blot确认所表达的蛋白;抗血清和纯化后的多克隆抗体Westerm Blot反应均为阳性.结论:利用大肠杆菌融合表达系统,获得了较高纯度的可溶形式hErmin160融合蛋白,并通过亲和纯化成功制备hEr-min160多克隆抗体.
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| 关 键 词： | 原核表达 多克隆抗体 |
Prokaryotic expression and polyclonal antibody generation of hErmin160 protein |
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| XU Qing,ZHAO Wei-Qin,WANG Tao,GUAN Lu-Yuan,CHEN Nan-Chun,ZHANG Bin. Prokaryotic expression and polyclonal antibody generation of hErmin160 protein[J]. Negative, 2008, 29(20): 1892-1895 |
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| Authors: | XU Qing ZHAO Wei-Qin WANG Tao GUAN Lu-Yuan CHEN Nan-Chun ZHANG Bin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hErmin |
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