| 泛素水解酶22调控丝裂原活化蛋白激酶激酶6基因的转录活性 |
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| 引用本文： | 刘建云,谢鑫,吴萍,熊建军. 泛素水解酶22调控丝裂原活化蛋白激酶激酶6基因的转录活性[J]. 中南大学学报(医学版), 2019, 44(2): 122-127. DOI: 10.11817/j.issn.1672-7347.2019.02.002 |
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| 作者姓名： | 刘建云 谢鑫 吴萍 熊建军 |
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| 作者单位： | 江西省系统生物医学重点实验室,江西九江,332000;九江学院基础医学院药理教研室,江西九江,332000;江西省系统生物医学重点实验室,江西九江332000;九江学院基础医学院药理教研室,江西九江332000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81860165)；江西省教育厅科技项目(151088)。 |
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| 摘 要： | 目的：克隆丝裂原活化蛋白激酶激酶6(mitogen-activated protein kinase kinase 6，MKK6)基因启动子，研究泛素水解酶22(ubiquitin specific peptidase 22，USP22)对MKK6转录活性的调控作用。方法：采用PCR扩增MKK6基因启动子片段，并以该片段为模板对USP22结合位点进行定点突变，将野生型与突变型启动子片段定向插入荧光素酶表达载体pGL3-Basic；用重组载体与内参质粒pRL-TK共转染HeLa细胞，行双荧光素酶活性检测以确定其转录活性；利用染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation，ChIP)实验观察USP22蛋白与MKK6启动子是否存在直接的结合；下调USP22表达后，检测MKK6转录活性的变化。结果：成功扩增MKK6启动子及其突变体并构建荧光素酶表达载体；USP22结合位点的突变导致该启动子活性在HeLa细胞中明显降低(P<0.05)；USP22与MKK6启动子在细胞中存在直接结合；抑制USP22的表达导致MKK6转录水平明显下降(P<0.05)。结论：在HeLa细胞中，USP22有效地调控MKK6基因的转录。
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| 关 键 词： | 泛素水解酶22 丝裂原活化蛋白激酶激酶6 启动子 转录 |
Ubiquitin specific peptidase 22 regulates the transcription activity of mitogen-activated protein kinase kinase 6 gene |
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| LIU Jianyun,XIE Xin,WU Ping,XIONG Jianjun. Ubiquitin specific peptidase 22 regulates the transcription activity of mitogen-activated protein kinase kinase 6 gene[J]. Journal of Central South University. Medical sciences, 2019, 44(2): 122-127. DOI: 10.11817/j.issn.1672-7347.2019.02.002 |
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| Authors: | LIU Jianyun XIE Xin WU Ping XIONG Jianjun |
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| Affiliation: | 1. Key Laboratory of Jiangxi Province for the Systems Bio-medicine, Jiujiang Jiangxi 332000; 2. Department of Pharmacology, College of Basic Medical Science, Jiujiang University, Jiujiang Jiangxi 332000, China |
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