低HMGB1含量的肿瘤细胞裂解物增强树突状细胞的抗肺癌作用 |
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作者姓名: | 潘中武 李思琪 王耀辉 刘海军 桂琳 董博翰 |
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作者单位: | 1. 皖南医学院医学微生物学与免疫学教研室;2. 皖南医学院生物化学教研室;3. 皖南医学院药学院 |
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基金项目: | 安徽高校自然科学研究重点项目(KJ2019A0415,KJ2020A0615);;安徽省教育厅高校优秀青年人才项目(重点)(gxyqZD2019040);;国家级大学生创新创业训练计划项目(202110368054); |
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摘 要: | 目的 探讨低含量高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的肿瘤细胞裂解物(TCL)对树突状细胞抗肺癌作用的影响。方法 反复冻融的方法制备Lewis肺癌细胞TCL。Western blot检测TCL中HMGB1蛋白的表达情况。用30 nmol/L甘草酸(GA)抑制Lewis肺癌细胞中HMGB1的表达,进而制备低含量HMGB1的TCL(LH-TCL)。用未处理的Lewis肺癌细胞制备正常含量HMGB1的TCL(NH-TCL)。分为不同剂量NH-TCL负载DC组、LH-TCL负载DC组及PBS对照组,用流式细胞术检测体外诱导的小鼠树突状细胞(DC)表面CD11b、CD11c、CD86表达或细胞凋亡,用酶联免疫吸附试验检测DC细胞IL-12分泌情况。分为NH-TCL刺激DC活化的脾细胞组、LH-TCL刺激DC活化的脾细胞组及PBS对照组,用流式细胞术检测小鼠脾细胞表面CD69的表达情况,酶联免疫吸附试验检测小鼠脾细胞TNF-β的分泌。分为NH-TCL刺激DC活化的脾细胞组、LH-TCL刺激DC活化的脾细胞组及PBS对照组,并设5∶1、10∶1、20∶1三个效靶比进行体外杀伤实验,采用CCK8法检测小鼠...
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关 键 词: | 肿瘤细胞裂解物 小鼠脾细胞 肺癌细胞 抗肿瘤免疫 高迁移率族蛋白B1 |
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