小鼠初级精母细胞GC-2中TUBB4B的表达及其对NF-κB和MAPK信号通路的调控

目的 探究微管蛋白（TUBB4B）与胞浆羧肽酶（CCP1）在小鼠初级精母细胞（GC-2）中的互相作用关系，以及TUBB4B在调控GC-2发育中的作用。方法 使用慢病毒感染GC-2细胞分别构建TUBB4B基因敲减组（TUBB4B-KD组）和阴性对照组（NCKD组）；TUBB4B基因过表达组（TUBB4B-OE组）与阴性对照组（NC-OE组），利用嘌呤霉素筛选稳定细胞株。采用RT-qPCR和Western blot分别在m RNA和蛋白水平上检测细胞模型是否构建成功，并进一步探究在GC-2细胞中TUBB4B与CCP1二者之间相互调控的表达关系。CCK8及流式细胞术检测TUBB4B沉默和过表达后对GC-2细胞增殖及周期的影响；Western blot及细胞免疫荧光实验找出TUBB4B沉默和过表达后发生表达改变的信号通路因子，并在细胞水平上进行标记验证。结果 GC-2中与NC-KD(NC-OE)组相比，TUBB4B沉默和过表达后，CCP1在mRNA和蛋白水平上的表达均发生一致的性改变（P<0.05）；同样CCP1敲减和恢复表达后与NC组相比，TUBB4B的表达也随之发生一致的性改变（P&...