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长、短链探针以链延伸反应提高基因传感器检测MRSA灵敏度的实验研究
引用本文:陈鸣,府伟灵,刘明华,张波,蒋天伦,公衍文,蔡国儒.长、短链探针以链延伸反应提高基因传感器检测MRSA灵敏度的实验研究[J].中华医院感染学杂志,2003,13(3):210-213.
作者姓名:陈鸣  府伟灵  刘明华  张波  蒋天伦  公衍文  蔡国儒
作者单位:1. 第三军医大学附属西南医院,重庆,400038
2. 国家信息产业部电子第二十六研究所,重庆,400060
基金项目:国家“九五”科技攻关项目 (96 - A2 3- 0 4 - 0 4 ),国家自然科学基金资助项目 (39870 831)
摘    要:目的:利用链延伸反应的原理延长引物链以提高石英谐振式基因传感器表面的质量负载,从而提高传感器检测MRSA的灵敏度。方法:以不对称PCR的反应产物做为长链探针,人工合成的寡核苷酸片段为短链探针,在基因传感器阵列表面分别固定上金黄色葡萄球菌mecA和femA的长链及短链探针共4种探针片段,与相应的靶序列杂交后,加入Klenow酶,37℃进行链延伸反应1h。结果:长、短链探针均有效地固定了传感器表面。mecA,femA短链探针在链延伸反应前的检测灵敏度为0.5nmol/L,但经链延伸反应后检测灵敏提高到了0.05nmol/L;而长链探针却无法与相应的基因组靶序列发生杂交。结论:短链探针链延伸反应有效地提高了石英谐振式基因传感器的灵敏度,但该法不适用于链探针。

关 键 词:基因传感器  金黄色葡萄球菌  DNA  灵敏度
文章编号:1005-4529(2003)03-0210-04
修稿时间:2002年8月28日

Sensitivity Improvement of Detecting MRSA Using Gene Sensor by Strand Extension Reaction with Long and Short Chain Probes
CHEN Ming,FU Wei ling,LIU Ming hua,ZHANG Bo,JIANG Tian lun,GONG Yan wen,CAI Guo ru.Sensitivity Improvement of Detecting MRSA Using Gene Sensor by Strand Extension Reaction with Long and Short Chain Probes[J].Chinese Journal of Nosocomiology,2003,13(3):210-213.
Authors:CHEN Ming  FU Wei ling  LIU Ming hua  ZHANG Bo  JIANG Tian lun  GONG Yan wen  CAI Guo ru
Abstract:
Keywords:Sensors  Staphylococcus aureus  DNA  Sensitivity
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