△CREB真核表达载体的构建及对心肌细胞TNFα含量的影响 |
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引用本文: | 李茜,余细勇,周钢,杨敏,刘志敏,邓春玉,林曙光. △CREB真核表达载体的构建及对心肌细胞TNFα含量的影响[J]. 中国病理生理杂志, 2002, 18(10): 1201-1205,T005 |
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作者姓名: | 李茜 余细勇 周钢 杨敏 刘志敏 邓春玉 林曙光 |
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作者单位: | 1. 浙江省人民医院工作,杭州,310014 2. 广东省人民医院,广东省心血管病研究所,广东,广州,510080 |
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基金项目: | 广东省重点科技攻关项目(99M04601G) |
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摘 要: | 目的构建ΔCREB的真核表达载体,观察其对TNFα等细胞因子的影响,探索心衰发生发展的始动因素.方法利用穿梭质粒pAdTrack构建核转录因子ΔCREB的真核表达载体pAdTrack-ΔCREB,然后转染培养的乳鼠心肌细胞.将心肌细胞随机分为空白对照组、forskolin(10 μmol/L)组、转染组和转染后加forskolin组,观察各组心肌细胞ΔCREB的表达以及TNFα含量的变化. 结果①定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)显示,ΔCREB/β-actin定量比值,转染组(1.001016±0.053520)明显高于对照组(0.761322±0.044090),(P<0.01);免疫细胞化学检测心肌细胞ΔCREB蛋白标记阳性率,转染组(28.88%+9.05%)亦明显高于对照组(6.63%+3.38%),(P<0.01).②细胞上清TNFα含量,转染后加forskolin组(34.36 pmol/L±12.17 pmol/L)明显高于对照组(16.91 pmol/L±5.16 pmol/L),(P<0.01).结论转染ΔCREB可显著升高心肌细胞TNFα含量.cAMP介导的CREB转录激活作用促进了TNFα基因表达,可能在心力衰竭的发展中起重要作用.
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关 键 词: | 肿瘤坏死因子 心力衰竭 转录因子 心肌细胞 TNFα △CREB真核表达载体 |
文章编号: | 1000-4718(2002)10-1201-05 |
Change of TNFα level after the transfection of ΔCREB eukaryotic expressive vector in neonatal rat cardiomyocytes |
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