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脐血CD34+细胞向巨核细胞的分化扩增及基因的表达变化
引用本文:王海莲,鞠秀丽,葛伟,李栋,沈柏均.脐血CD34+细胞向巨核细胞的分化扩增及基因的表达变化[J].山东大学学报(医学版),2009,47(11):95-99.
作者姓名:王海莲  鞠秀丽  葛伟  李栋  沈柏均
作者单位:山东大学 1. 第二医院儿科, 济南 250033; 2. 齐鲁医院儿科, 济南 250012
基金项目:山东省医药卫生科研项目 
摘    要:目的研究脐血CD34+细胞向巨核细胞的诱导分化及体外扩增,并观察此过程中巨核细胞特异性基因表达的变化。方法免疫磁珠法分离获得CD34+细胞培养在无血清无基质培养基中,采用TPO+SCF+IL 3+IL 6、 TPO+SCF+IL 3、 TPO+SCF三种不同因子组合对其诱导分化及扩增。收集3、7、10、14?d的扩增产物,运用荧光显微镜检测巨核细胞的表面标志;流式细胞术(FCM)检测巨核细胞的凋亡;对巨核细胞进行DNA含量检测以及荧光定量PCR检测特异性基因表达的变化。结果分离获得的CD34+细胞在体外可以有效扩增,随培养时间的延长,CD34+/CD41+细胞数第7天达最高值,之后逐渐下降;而CD41+、CD42b+、CD61+细胞随培养时间的延长表达量逐渐增高。DNA含量检测发现,随着培养天数的增加,多倍体细胞所占的百分比增加。三种因子组合中TPO+SCF+IL 3+IL 6组扩增效率最高。荧光定量PCR显示转录因子GATA 1、NF E2、TXS、GPIIb和HPRT在第7天表达量最高,之后下降。凋亡转录因子APAF 1随培养天数的延长表达量增加。结论脐血CD34+细胞在体外可向巨核细胞诱导分化及扩增,其基因表达的变化也支持这一结论。

关 键 词:脐血    CD34+细胞    巨核细胞    扩增  
收稿时间:2009-03-30

Differentiation and expansion of megakaryocytes from CD34+ cells derived from umbilical cord blood and change of gene expression
WANG Hai-lian,JU Xiu-li,GE Wei,LI Dong,SHEN Bo-jun.Differentiation and expansion of megakaryocytes from CD34+ cells derived from umbilical cord blood and change of gene expression[J].Journal of Shandong University:Health Sciences,2009,47(11):95-99.
Authors:WANG Hai-lian  JU Xiu-li  GE Wei  LI Dong  SHEN Bo-jun
Institution:1. Department of Pediatrics, Second Hospital of Shandong University, Jinan 250033, China;
2. Department of Pediatrics, Qilu Hospital of Shandong University, Jinan 250012, China
Abstract:
Keywords:Cord blood  CD34~+ cells  Megakaryocyte  Expansion
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