身痛逐瘀汤对人髓核细胞模型PI3K/Akt信号通路Bad、Caspase-9、GSK-3β表达的影响

目的观察身痛逐瘀汤对人髓核细胞模型PI3K/Akt信号通路凋亡蛋白Bad、Caspase-9、GSK-3β表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法将人髓核细胞分为6组,分离培养、鉴定及传代后,取第3代细胞进行实验。人髓核细胞加入身痛逐瘀汤药物血清,置于医用恒温静水压压力罐中干预,分别于0.3、1、3 MPa压力下作用2、4、6 h,应用倒置相差显微镜观察人髓核细胞加压前后形态及生长状况,应用透射电子显微镜观察人髓核细胞超微结构,流式细胞术检测人髓核细胞凋亡,采用凝胶电泳迁移法检验人髓核细胞PI3K/Akt信号通路标志蛋白p-Akt的表达,Western blot检测人髓核细胞Bad、Caspase-9、GSK-3β蛋白的表达。结果同一压力下及作用时间,中药组人髓核细胞形态、超微结构和生长状况较压力组明显变好,其中0.3、1 MPa压力差异显著(P<0.05);与中药组比较,压力组人髓核细胞凋亡率显著增加(P<0.05);凝胶电泳迁移显示,人髓核细胞在0.3、1、3 MPa压力下中药组p-Akt表达明显高于压力组(P<0.05);Western blot结果显示,中药组人髓核细胞Bad、Caspase-9、GSK-3β蛋白表达较压力组明显降低(P<0.05)。结论身痛逐瘀汤能有效延缓髓核细胞退变,增加细胞活性及减少细胞凋亡,其机制可能与激活PI3K/Akt通路抑制Bad、Caspase-9、GSK-3β蛋白的表达相关。