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人细小病毒B19三种基因型通用核酸检测体系的建立与评价
引用本文:贾俊婷,郭逸,赵雄,马玉媛,章金刚. 人细小病毒B19三种基因型通用核酸检测体系的建立与评价[J]. 军事医学科学院院刊, 2015, 0(3)
作者姓名:贾俊婷  郭逸  赵雄  马玉媛  章金刚
作者单位:1. 军事医学科学院野战输血研究所,国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室,北京 100850
2. 陕西省血液中心,西安,710061
基金项目:北京市自然科学基金资助项目
摘    要:目的:建立能同时检测人细小病毒B19(简称B19病毒)3种基因型的通用核酸检测( NAT)体系,并进行方法学评价。方法对B19病毒3种基因型代表毒株全序列进行比对,选取其保守区域( NS1区)设计B19病毒的通用引物和探针。为避免假阴性结果,在体系中引入竞争性噬菌体内标。将适宜浓度的内标添加到一系列梯度稀释的参考品质粒中,建立B19病毒实时荧光定量PCR( qPCR)标准曲线。对建立的B19病毒通用NAT体系分别进行敏感性、特异性、重复性等方法学评价。结果建立的B19病毒实时qPCR检测体系的标准曲线在1×109~1× 103拷贝(copies)/μl模板浓度范围内相关性良好。方法学评价显示,体系的最低检测下限为10拷贝/μl;与其他血源传播病毒等无交叉反应;批内和批间实验重复性良好。结论建立了B19病毒3种基因型全检的通用NAT体系,不仅可用于B19病毒感染的诊断,还可用于血液和血液制品中B19病毒的NAT筛查,对于保障输血和血液制品的病毒安全性具有重要意义。

关 键 词:人细小病毒B19  TaqMan荧光定量PCR  核酸检测

Establishment and evaluation of a universal nucleic acid test method for detecting human parvovirus B19
JIA Jun-ting,GUO Yi,ZHAO Xiong,MA Yu-yuan,ZHANG Jin-gang. Establishment and evaluation of a universal nucleic acid test method for detecting human parvovirus B19[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2015, 0(3)
Authors:JIA Jun-ting  GUO Yi  ZHAO Xiong  MA Yu-yuan  ZHANG Jin-gang
Abstract:
Keywords:human parvovirus B19  TaqMan real-time fluorescent quantitative PCR  nucleic acid test
本文献已被 万方数据 等数据库收录!
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