| 人细小病毒B19三种基因型通用核酸检测体系的建立与评价 |
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| 引用本文： | 贾俊婷,郭逸,赵雄,马玉媛,章金刚.人细小病毒B19三种基因型通用核酸检测体系的建立与评价[J].军事医学科学院院刊,2015(3). |
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| 作者姓名： | 贾俊婷 郭逸 赵雄 马玉媛 章金刚 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院野战输血研究所，国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室，北京 100850
2. 陕西省血液中心,西安,710061 |
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| 基金项目： | 北京市自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的：建立能同时检测人细小病毒B19（简称B19病毒）3种基因型的通用核酸检测（ NAT）体系，并进行方法学评价。方法对B19病毒3种基因型代表毒株全序列进行比对，选取其保守区域（ NS1区）设计B19病毒的通用引物和探针。为避免假阴性结果，在体系中引入竞争性噬菌体内标。将适宜浓度的内标添加到一系列梯度稀释的参考品质粒中，建立B19病毒实时荧光定量PCR（ qPCR）标准曲线。对建立的B19病毒通用NAT体系分别进行敏感性、特异性、重复性等方法学评价。结果建立的B19病毒实时qPCR检测体系的标准曲线在1×109～1× 103拷贝（copies）／μl模板浓度范围内相关性良好。方法学评价显示，体系的最低检测下限为10拷贝／μl；与其他血源传播病毒等无交叉反应；批内和批间实验重复性良好。结论建立了B19病毒3种基因型全检的通用NAT体系，不仅可用于B19病毒感染的诊断，还可用于血液和血液制品中B19病毒的NAT筛查，对于保障输血和血液制品的病毒安全性具有重要意义。
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| 关 键 词： | 人细小病毒B19 TaqMan荧光定量PCR 核酸检测 |
Establishment and evaluation of a universal nucleic acid test method for detecting human parvovirus B19 |
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| JIA Jun-ting,GUO Yi,ZHAO Xiong,MA Yu-yuan,ZHANG Jin-gang.Establishment and evaluation of a universal nucleic acid test method for detecting human parvovirus B19[J].Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences,2015(3). |
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| Authors: | JIA Jun-ting GUO Yi ZHAO Xiong MA Yu-yuan ZHANG Jin-gang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human parvovirus B19 TaqMan real-time fluorescent quantitative PCR nucleic acid test |
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