| 自杀质粒同源重组方法构建弗氏志贺菌htrA可控表达菌株 |
| |
| 引用本文： | 杨晶,陆丽兰,徐萍,刘红胜,冯尔玲,王恒樑,朱力.自杀质粒同源重组方法构建弗氏志贺菌htrA可控表达菌株[J].军事医学科学院院刊,2015(5). |
| |
| 作者姓名： | 杨晶 陆丽兰 徐萍 刘红胜 冯尔玲 王恒樑 朱力 |
| |
| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(81171531，81125012，81373316)；国家973计划资助项目 |
| |
| 摘 要： | 目的：构建弗氏志贺菌HtrA蛋白的可控表达菌株。方法构建自杀质粒同源重组载体，利用重组方法在基因组htrA前插入阿拉伯糖启动子，同时构建并导入外源表达AraC蛋白的表达载体，实现对HtrA蛋白的可控表达；在此基础上，通过蛋白印迹实验，检测诱导前后全菌以及周质中HtrA蛋白的表达情况。结果测序结果表明，自杀质粒同源重组载体以及外源表达载体构建成功；蛋白印迹实验结果显示，对比阿拉伯糖诱导菌株，未诱导菌株中基本未检测到HtrA蛋白的表达。结论自杀质粒同源重组方式可在无阿拉伯糖时有效阻遏HtrA蛋白的表达；同时在诱导后，还可恢复HtrA蛋白的正常表达，有利于后续功能研究。
|
| 关 键 词： | 志贺菌 弗氏 htrA基因 自杀质粒同源重组 阿拉伯糖操纵子 免疫印迹法 |
Arabinose-controlled expression of htrA in Shigella flexneri through suicide plasmid-mediated homologous recombination |
| |
| YANG Jing,LU Li-lan,XU Ping,LIU Hong-sheng,FENG Er-ling,WANG Heng-liang,ZHU Li.Arabinose-controlled expression of htrA in Shigella flexneri through suicide plasmid-mediated homologous recombination[J].Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences,2015(5). |
| |
| Authors: | YANG Jing LU Li-lan XU Ping LIU Hong-sheng FENG Er-ling WANG Heng-liang ZHU Li |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Shigella flexneri htrA gene suicide plasmid-mediated homologous recombination arabinose operon Western blotting |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
