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嗜麦芽窄食单胞菌热休克蛋白HSP70的表达、纯化及抗原性研究
作者姓名:许广杨  尚学义  汤雪萍  钱垚  姜永强  李艳
作者单位:1. 安徽医科大学解放军 307 医院临床学院,合肥230032; 解放军307医院重症医学科,北京 100071; 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室,北京 100071
2. 解放军307医院重症医学科,北京,100071
3. 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071
基金项目:国家科技重大专项资助项目(2013 ZX10004202002);国家自然科学基金资助项目(81071399,81271887);首都医学发展科研基金资助项目
摘    要:目的:验证嗜麦芽窄食单胞菌热休克蛋白HSP70(DnaK)的抗原性。方法以嗜麦芽窄食单胞菌K279a为模板,PCR扩增DnaK基因的全序列,将该序列连接到pET-30a载体,转入大肠杆菌BL-21中,经1 mmol/L的IPTG 37℃诱导表达,目的蛋白纯化后进行Western印迹。结果与结论 Western 印迹证实表达的重组蛋白能与鼠抗人HSP70单抗特异性结合,且与该菌的全菌免疫后血清有反应,而与免疫前血清无反应。嗜麦芽窄食单胞菌HSP70具有抗原性,可作为保护性抗原候选分子。

关 键 词:嗜麦芽窄食单胞菌  热休克蛋白HSP70  重组蛋白  抗原性
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