GFP共表达检测重组型Caspase—3对HeLa细胞凋亡的诱导作用 |
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引用本文: | 贾林涛,于翠娟,许彦鸣,赵晶,高下,张淼丽,王成济,杨安钢. GFP共表达检测重组型Caspase—3对HeLa细胞凋亡的诱导作用[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2001, 17(3): 218-221 |
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作者姓名: | 贾林涛 于翠娟 许彦鸣 赵晶 高下 张淼丽 王成济 杨安钢 |
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作者单位: | 1. 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室 2. 西京医院耳鼻咽喉科 3. 第四军医大学解剖学教研室 |
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基金项目: | 国家杰出青年科学基金资助,No.39925036;军队杰出青年科学基金资助,No.98J009 |
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摘 要: | 目的 探讨由野生型人caspase-3大小基颠倒构建重组型capase-3的促细胞凋亡活性。方法 用TR-PCR法获得人caspase-3基因。通过重组PCR 进行改造,构建小亚基位于大亚基之前的两种重组型caspase-3基因,它们所对应的蛋白质的N端,分别带有或没有其自身识别的四肽序列。将上述基因克隆入绿色荧光蛋白(GFP)表达载体pIRES2-EGFP中,转染入HeLa细胞,在荧光显微镜和电镜下观察转染细胞的形态和结构。结果 成功地获得了野生型caspase-3基因及两种重组型caspase-3基因。构建了重组型caspase-3基因的表达载体。转染HeLa细胞后,重组型caspase-3基因在细胞中得到表达,随后引起细胞荧光强度下降,生长状况变差甚至死亡。电镜观察显示,许多细胞呈现凋亡的典型特征。结论 重组型caspase-3可促进HrLa细胞的凋亡。
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关 键 词: | 半胱天冬酶-3 细胞凋亡 绿色荧光蛋白 |
文章编号: | 1007-8738(2001)03-218-04 |
修稿时间: | 2000-10-12 |
lnvestigation of induction of recombinant caspase-3 on the HeLa cells apoptosis through coexpression with GFP |
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