| HLA-C和HLA-G基因真核细胞双表达载体的克隆及鉴定分析 |
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| 引用本文： | 张磊,杨珏琴,姚芳娟,许玲娣,范丽安. HLA-C和HLA-G基因真核细胞双表达载体的克隆及鉴定分析[J]. 免疫学杂志, 2004, 20(5): 334-337,342 |
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| 作者姓名： | 张磊 杨珏琴 姚芳娟 许玲娣 范丽安 |
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| 作者单位： | 上海市免疫学研究所,上海第二医科大学,上海,200025;上海市免疫学研究所,上海第二医科大学,上海,200025;上海市免疫学研究所,上海第二医科大学,上海,200025;上海市免疫学研究所,上海第二医科大学,上海,200025;上海市免疫学研究所,上海第二医科大学,上海,200025 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (30 0 70 784、30 371 350 )，上海市科委重点项目 (0 2DJ1 4 0 54)资助 |
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| 摘 要： | 目的 构建人HLA-C和HLA-G基因真核细胞双表达载体。方法 用RT-PCR从孕妇蜕膜组织有核细胞总mRNA中逆转录扩增全长HLA-C和HLA-G cDNA，首先将HLA-G经BamHⅠ和ClaⅠ双酶切，HLA-C经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后，分别定向插入真核细胞双顺反子载体pVITRO2的多克隆位点1(mes1)和2(mes2)中，然后经酶切和测序鉴定，确定已建立pVITRO2的单表达质粒pVITRO2-HLA-G和pVITRO2-HLA-C，再将HLA-CcDNA经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切，定向插入单表达质粒pVITRO2-HLA-G的多克隆位点2(mes2)中，经PCR反应初筛，再经双酶切鉴定。结果 限制性内切酶和测序分析表明已成功构建了HLA-Cw*0103和HIA-G*0101的单表达质粒pVITRO2-HLA-C和pVITRO2-HLA-G以及双表达质粒pVITRO2-HLA-CG。结论 本研究成功构建了真核细胞双顺反子载体pVITRO2的双表达质粒pVITRO2-HLA-CG，以及单表达质粒pVITRO2-HLA-C和pVITRO2-HLA-G。
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| 关 键 词： | HLA-C HLA-G 双顺反子载体pVITRO2 双表达质粒 |
| 文章编号： | 1000-8861(2004)05-0334-05 |
Clone and identification of the eukaryotic co-expression vector of human HLA-G and HLA-C genes with bicistronic vector pVITRO2 |
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| ZHANG Lei,YANG Jue-qin,YAO Fang-juan,XU Ling-di,FAN Li-an. Clone and identification of the eukaryotic co-expression vector of human HLA-G and HLA-C genes with bicistronic vector pVITRO2[J]. Immunological Journal, 2004, 20(5): 334-337,342 |
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| Authors: | ZHANG Lei YANG Jue-qin YAO Fang-juan XU Ling-di FAN Li-an |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HLA- C HLA- G Bicistronic vector pVITRO2 Co-expression vector |
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