腺病毒载体介导肾癌相关抗原G250基因转染DC诱导CTL治疗肾癌的实验研究

目的 探讨以腺病毒载体介导肾癌相关抗原G250（Ad-G250）基因转染制备树突状细胞(DC)瘤苗，体外诱导自体T淋巴细胞特异性抗肾癌免疫效应。方法 自健康人外周血中提取单核细胞，将贴壁细胞分为3组（Ad-G250基因转染组、G250蛋白致敏组、未致敏组），用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rGM-CSF）和白细胞介素-4（rhIL-4）诱导活化；在3组DC细胞中分别加入自体T淋巴细胞，获得3组不同的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）。RT-PCR检测G250在DC细胞内的转录情况；流式细胞仪检测DC表面标志分子和G250抗原蛋白的表达情况；四甲基偶氮唑盐法（MTT）检测3组CTL对不同靶细胞（肾癌细胞株786-0、肺癌细胞株A549）的杀伤活性。结果 Ad-G250高效转染DC，G250蛋白在DC内成功表达：采用RT-PCR成功在基因转染组DC中扩增出G250产物；Ad-G250转染的DC表面标志CD40、CD80、CD83、CD86、HLA-DR与其它两组相比有显著性差异（P<0.05），Ad-G250组明显高表达，表明Ad-G250基因转染组可上调DC表面标志表达；Ad-G250组诱导的CTL对G250阳性的786-0靶细胞有很好的细胞毒杀伤效应，此杀伤活性优于G250蛋白致敏组及对照组（P<0.05）。结论 以腺病毒为载体介导抗原基因转染DC，并诱导特异的CTL，从技术上是可行的，而且所诱导的CTL杀伤活性好于采用G250蛋白冲击致敏DC所诱导的CTL，有望成为一种肿瘤免疫治疗的理想方法。此研究方法也说明了以G250为靶点的免疫治疗可能是肾透明细胞癌一种理想治疗模式。

The experimental Study of Ad carrying G250 antigen gene transfecting DC activating the CTL for kidyney cancer treatment