响应面分析法在胆碱酯酶测量条件优化中的应用 |
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引用本文: | 金仁玲,刘春龙,孙慧颖,胡滨,陈宝荣. 响应面分析法在胆碱酯酶测量条件优化中的应用[J]. 临床检验杂志, 2014, 0(3): 193-195 |
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作者姓名: | 金仁玲 刘春龙 孙慧颖 胡滨 陈宝荣 |
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作者单位: | 遵义医学院,贵州遵义563003;北京航天总医院检验科,北京100076;北京航天总医院检验科,北京100076;北京航天总医院检验科,北京100076;北京航天总医院检验科,北京100076 |
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摘 要: | 目的筛选胆碱酯酶(ChE)的最佳测量条件。方法选择5,5'-二硫双(2-硝基苯甲酸)法(DTNB)测量ChE的关键影响因子,用单因素分析法确定响应面分析法(RSM)的理想实验区域,用RSM的中央合成设计建立相应的反应面模型,获得影响因子响应值的关系方程。用Minitab 15软件进行RSM测量条件优化,筛选出ChE最佳测量条件并进行验证。结果 ChE测量的关键影响因子为缓冲液pH值(A)、丁酰硫代胆碱浓度(B)、DTNB浓度(C)。RSM的理想实验区域为缓冲液pH值7.6~9.2;丁酰硫代胆碱浓度6.7~20.1 mmol/L;DTNB浓度0.2~0.4 mmol/L。各影响因子与响应值(Y)的关系方程为Y=8 476.13-73.29A+20.00B-4.56C-126.86A2+32.85B2+71.48C2-55.47AB-1.06AC-16.34BC。ChE的最佳测量条件为缓冲液pH值8.10;丁酰硫代胆碱浓度13.40 mmol/L;DTNB浓度0.29 mmol/L,此条件下ChE催化活性为8 755 U/L,相当于理论最高酶活性的95%以上。结论用RSM成功筛选出ChE最佳测量条件,建立了合理可行的ChE测量影响因子的RSM多因子分析模型。
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关 键 词: | 胆碱酯酶;响应面分析法;酶催化活性 |
收稿时间: | 2013-12-21 |
修稿时间: | 2014-02-18 |
Optimization of measuring conditions of cholinesterase by response surface methodology |
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Abstract: | |
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Keywords: | cholinesterase response surface methodology enzyme catalytic activity |
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