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人转化生长因子TGF-β3基因合成及其在大肠杆菌中的表达
引用本文:人转化生长因子TGF-β3基因合成及其在大肠杆菌中的表达[J]. 中国药科大学学报, 2003, (3): 70-73.
作者姓名:黄亚东  苏志坚  郑青  赵文  许华  吴晓萍  胡晓辉  李校堃  刘丙萍
作者单位:1. 暨南大学医药生物技术研究开发中心,广州,510632
2. 暨南大学药学院,广州,510632
3. 山东曲阜师范大学,曲阜,273165
基金项目:国家“973”基金资助项目 (编号G19990 5 42 0 4),广州市科技攻关项目 (编号 2 0 0 2E3 E4111)~~
摘    要:目的:构建能高效表达人转化生长因子β3(TGF-β3)的基因工程菌。方法:用PCR方法扩增人转化生长因子β3的cDNA,将该cDNA片段插入表达载体pET3c的表达框架中,构建了表达菌株BL21/pET-TGF-β3。IPTG诱导表达。通过阳离子交换、变性分子筛层析纯化重组蛋白。用Western-blot杂交检测重组蛋白的免疫原性。结果:所构建的表达菌株,其TGF-β3的表达量占菌体总蛋白25%以上。经纯化获得了银染一条带的重组蛋白。免疫学检测表明重组蛋白具有较强的抗原特异性。结论:人转化生长因子β3在大肠杆菌中实现了高效表达,获得了具有免疫原性的重组TGF-β3。

关 键 词:人转化生长因子β3  克隆  表达
文章编号:1000-5048(2003)03-0264-04
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