| 纳米磁流体介导的重组pEGFP-AFP-TK对AFP表达阳性肝癌细胞HepG2的杀伤作用的体外实验 |
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| 引用本文： | 罗勇,张阳德,彭健,颜焕新,薛敦,吴凯,周琳,韩世伟,赵劲风.纳米磁流体介导的重组pEGFP-AFP-TK对AFP表达阳性肝癌细胞HepG2的杀伤作用的体外实验[J].细胞与分子免疫学杂志,2009,25(5). |
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| 作者姓名： | 罗勇 张阳德 彭健 颜焕新 薛敦 吴凯 周琳 韩世伟 赵劲风 |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅医院卫生部纳米生物技术重点实验室,湖南,长沙,410008 |
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| 摘 要： | 目的: 探讨纳米磁流体介导的重组质粒pEGFP-AFP-TK对AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2的杀伤作用.方法:通过纳米磁流体将构建好的重组质粒pEGFP-AFP-TK 并分别转染AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2 及AFP表达阴性肝癌细胞SMMC-7721,于荧光显微镜下动态观察;使用RT-PCR和Western blot分析HepG2 细胞中TK 基因的表达情况,MTT法检测转染重组TK表达质粒后的细胞在更昔洛韦(GCV)作用下的存活率并观察旁观者效应,用流式细胞术分析HepG2细胞的凋亡.结果:纳米磁流体能将重组质粒pEGFP-AFP-TK转入AFP阳性的HepG2 细胞,其转染效率高于脂质体;RT-PCR 及Western blot证明转染的AFP阳性的HepG2 细胞有TK基因的表达;MTT 及流式细胞术分析说明TK基因发挥杀伤细胞作用.结论:纳米磁流体能将重组质粒pEGFP-AFP-TK转染HepG2细胞并获得表达,可作为肝癌基因治疗的基因载体,采用AFP增强子可使目的基因在HepG2 细胞中特异性表达,并且在前药GCV的作用下,能使AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2发生凋亡及旁观者效应.
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| 关 键 词： | 纳米磁流体 TK基因 |
Recombinant plasmid pEGFP-AFP-TK delivered by nano-magnetic fluds targeting killed AFP positive HepG2 cells in vitro |
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| LUO Yong,ZHANG Yang-de,PENG Jian,YAN Huan-xin,XUE Dun,WU Kai,ZHOU Lin,HANG Shi-wei,ZHAO Jin-feng.Recombinant plasmid pEGFP-AFP-TK delivered by nano-magnetic fluds targeting killed AFP positive HepG2 cells in vitro[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2009,25(5). |
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| Authors: | LUO Yong ZHANG Yang-de PENG Jian YAN Huan-xin XUE Dun WU Kai ZHOU Lin HANG Shi-wei ZHAO Jin-feng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | AFP GCV |
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