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磁性小干扰RNA纳米微粒的制备及其转染人膀胱癌细胞对沉默survivin基因表达影响的研究(英文)
引用本文:曹正国,孙友文,诸禹平,苏红,吴斌,刘继红,周四维.磁性小干扰RNA纳米微粒的制备及其转染人膀胱癌细胞对沉默survivin基因表达影响的研究(英文)[J].中国现代医学杂志,2008,18(4):385-390.
作者姓名:曹正国  孙友文  诸禹平  苏红  吴斌  刘继红  周四维
作者单位:1. 安徽医科大学附属省立医院,泌尿外科,安徽,合肥,230001
2. 华中科技大学同济医学院附属同济医院,泌尿外科,湖北,武汉,430030
基金项目:安徽省自然科学基金 , Anhui Provincial Colleges and Universities Natural Science Foundation , 国家自然科学基金
摘    要:目的研究磁性小干扰RNA(silkNA)重组质粒纳米微粒的制备及其在外磁场协同作用下转染人膀胱癌细胞对膀胱癌细胞凋亡和沉默survivin基因表达的影响。方法利用化学共沉淀法制备葡聚糖磁性纳米微粒(DMN)并作为基因载体,通过多聚赖氨酸静电吸附作用制备磁性siRNA—survivin—DMN重组质粒纳米微粒,并在外磁场的协同作用下体外转染人膀胱癌BIU-87细胞,分别采用四甲基偶氮唑蓝比色法、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术法、半定量逆转录聚合酶链反应和Westem Blotting检测BI—U-87细胞的生长抑制率(IR)、凋亡指数(AI)、survivinmRNA及其蛋白的相对表达水平。结果构建成功的siRNA-DMN直径、有效粒径、比饱和磁化强度分别为10-12nm、94.8nm、0.19emu/g。DMN在外磁场的协同作用下转染siRNA重组质粒入BIU-87细胞后的IR(39.60%)、AI(28.72%)均分别显著高于对照组和无磁场协同作用的siRNA—DMN组(1.99%、3.75%和20.96%、16.71%)(均P〈0.05),survivin mRNA及其蛋白相对表达水平均显著低于后2组。结论磁性siRNA—DMN纳米微粒在外磁场的协同作用下转染BIU-87细胞后可有效抑制survivin基因表达并诱导细胞凋亡,为膀胱肿瘤的磁靶向基因治疗提供实验依据。

关 键 词:小干扰RNA  膀胱肿瘤  survivin  纳米微粒  small  interfering  RNA  bladder  neoplasm  survivin  nanoparticles  磁性  小干扰  纳米微粒  转染  人膀胱  癌细胞  survivin  mRNA  基因表达  影响  研究  cell  apoptosis  bladder  cancer  human  inducing  gene  expression  silencing  transfection  effects  nanoparticles  small  interfering  RNA
文章编号:1005-8982(2008)04-0385-06
收稿时间:2007-06-02
修稿时间:2007年6月2日

Construction of magnetic small interfering RNA nanoparticles and effects of its transfection on silencing survivin gene expression and inducing human bladder cancer cell apoptosis
CAO Zheng-guo,SUN You-wen,ZHU Yu-ping,SHU Hong,WU Bin,LIU Ji-hong,ZHOU Si-wei.Construction of magnetic small interfering RNA nanoparticles and effects of its transfection on silencing survivin gene expression and inducing human bladder cancer cell apoptosis[J].China Journal of Modern Medicine,2008,18(4):385-390.
Authors:CAO Zheng-guo  SUN You-wen  ZHU Yu-ping  SHU Hong  WU Bin  LIU Ji-hong  ZHOU Si-wei
Institution:CAO Zheng-guo1,SUN You-wen1,ZHU Yu-ping1,SHU Hong1,WU Bin1,LIU Ji-hong2,ZHOU Si-wei2 (1.Department of Urology,Anhui Provincial Hospital Affiliated to Anhui Medical College,Hefei,Anhui 230001,P.R.China,2.Department of Urology,Tongji Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science , Technology,Wuhan,Hubei 430030,P.R.China)
Abstract:Objective To investigate the construction of the magnetic small interfering RNA (siRNA) plasmid nanoparticles and the effects of its transfection on silencing survivin gene expression and inducing human bladder cancer cells apoptosis in combination with external magnetic fields in vivo. Methods The siRNA-survivin recombinant plasmid specific targeted survivin was synthesized in previous experiment. DMN were prepared by chemical coprecipitation method and used as a gene carrier. The magnetic siRNA-survivin-D...
Keywords:small interfering RNA  bladder neoplasm  survivin  nanopartieles
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