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Fascin真核表达载体的构建及其在肺癌A549细胞中的表达
引用本文:赵晋波,马楠,白光振,张志培,姜涛,韩勇,周勇安,李小飞.Fascin真核表达载体的构建及其在肺癌A549细胞中的表达[J].现代肿瘤医学,2011,19(11):2157-2160.
作者姓名:赵晋波  马楠  白光振  张志培  姜涛  韩勇  周勇安  李小飞
作者单位:1. 第四军医大学唐都医院胸腔外科,陕西,西安,710038
2. 第四军医大学唐都医院眼科,陕西,西安,710038
基金项目:国家自然科学基金资助项目,第四军医大学唐都医院苗子人才基金
摘    要:目的:构建fascin基因的pcDNA3.1(+)表达载体pcDNA3.1(+)-fascin,将其转染肺癌A549细胞,观察其表达,并检测转染前后细胞内F-肌动蛋白(F-actin)的变化。方法:应用RT-PCR从Hela细胞中扩增fascin基因,酶切后和真核表达载体pcDNA3.1(+)重组,获得重组表达载体pcDNA3.1(+)-fascin。经酶切、电泳,DNA测序鉴定后,将其及对照空载体转染肺癌A549细胞,采用Western blotting检测fascin在A549细胞中的表达情况;免疫荧光染色后采用激光共聚焦显微镜观察fascin对F-actin的影响。结果:成功克隆fascin基因片段,并将其重组到pcDNA3.1(+)载体中,经酶切及DNA测序鉴定正确。pcDNA3.1(+)-fascin转染A549细胞,Western blotting鉴定转染后fascin在A549细胞中高表达。激光共聚焦显示fascin基因能够在A549细胞内促进F-actin形成丝状突出。结论:成功构建了pcDNA3.1(+)-fascin真核表达载体,并将其转染肺癌A549细胞;激光共聚焦观察显示fascin能够促进A549细胞内F-actin形成丝状突出,可能是促进A549细胞转移的结构基础之一。

关 键 词:非小细胞肺癌  成束蛋白fascin  A549细胞  丝状突出

Construction of fascin gene eukaryotic expression vector and its expression in lung cancer A549 cells
ZHAO Jinbo,MA Nan,BAI Guangzhen,ZHANG Zhipei,JIANG Tao,HAN Yong,ZHOU Yongan,LI Xiaofei.Construction of fascin gene eukaryotic expression vector and its expression in lung cancer A549 cells[J].Journal of Modern Oncology,2011,19(11):2157-2160.
Authors:ZHAO Jinbo  MA Nan  BAI Guangzhen  ZHANG Zhipei  JIANG Tao  HAN Yong  ZHOU Yongan  LI Xiaofei
Institution:ZHAO Jinbo1,MA Nan2,BAI Guangzhen1,ZHANG Zhipei1,JIANG Tao1,HAN Yong1,ZHOU Yongan1,LI Xiaofei1 1Deparment of Thoracic Surgery,Tangdu Hospital,Fourth Military Medical University,Shaanxi Xi'an 710038,China,2Deparment of Ophthalmology
Abstract:
Keywords:non-small cell lung cancer  fascin  A549 cells  filopodia  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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