慢病毒载体介导HIF-1α RNAi对人胰腺癌细胞Patu8988相关基因表达的影响 |
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引用本文: | 范光磊,邓民斌,吴翼伟,杨其贤,章斌,徐龙宝.慢病毒载体介导HIF-1α RNAi对人胰腺癌细胞Patu8988相关基因表达的影响[J].中华核医学杂志,2013,33(5). |
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作者姓名: | 范光磊 邓民斌 吴翼伟 杨其贤 章斌 徐龙宝 |
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作者单位: | 1. 213003,南京医科大学附属常州第二人民医院核医学科体外免疫室 2. 苏州大学附属第一人民医院核医学科 |
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摘 要: | 目的 探讨慢病毒表达载体介导HIF-1α RNA干扰(RNAi)对人胰腺癌细胞Patu8988HIF-1α和Glut-1表达的影响.方法 构建针对HIF-1α基因的RNAi慢病毒表达载体LV-RNAi-HIF-1α.乏氧条件下体外培养4h,转染LV-RNAi-HIF-1α的Patu8988细胞为实验组;转染空病毒载体和未转染任何病毒载体Patu8988细胞分别为阴性对照组和空白对照组.采用荧光定量RT-PCR和Western印迹法检测Patu8988细胞HIF-1α表达情况,采用RT-PCR法检测转染LV-RNAi-HIF-1α后Patu8988细胞Glut-1的表达情况.采用SPSS 17.0软件行单因素方差分析和两样本t检验分析各组之间的差异.结果 构建的慢病毒表达载体LV-RNAi-HIF-1α,在常氧和乏氧状态下致HIF-1α mRNA表达分别下降65.1%(0.209/0.321)和80.6% (0.791/0.982)(t=10.52和15.24,均P<0.05),阴性对照组分别为0.6%(0.002/0.321)和7.2%(0.071/0.982)(t=5.26和7.38,均P<0.05);乏氧状态下实验组、阴性对照组和空白对照组HIF-1α蛋白的表达分别为0.159±0.010、0.745±0.012和0.711±0.023,差异有统计学意义(F=35.52,t=6.72和10.56,均P<0.05),实验组较其他2组表达下降;乏氧条件下实验组Glut-1 mRNA表达(0.040±0.003)较阴性对照组(0.054±0.003)和空白对照组(0.062±0.004)均有明显下降(F=35.28,t=5.94和8.55,均P<0.01).结论 通过构建LV-RNAi-HIF-1α慢病毒表达载体沉默HIF-1α基因表达,可降低Patu8988胰腺癌细胞Glut-1 mRNA表达.
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关 键 词: | 胰腺肿瘤 肿瘤细胞 培养的 基因表达 缺氧诱导因子-1 α亚基 RNA干扰 |
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