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| 华支睾吸虫cDNA表达文库的构建及初步筛选 | |
| 引用本文： | 陈守义,余新炳,徐劲,蒋忠军,吴德,何东苟,林睿. 华支睾吸虫cDNA表达文库的构建及初步筛选[J]. 中国热带医学, 2003, 3(3): 282-284 |
| 作者姓名： | 陈守义 余新炳 徐劲 蒋忠军 吴德 何东苟 林睿 |
| 作者单位： | 1. 中山大学中山医学院病原生物学部,广州市,510089 2. 广州军区联勤部医学研究所 3. 广西南宁寄生虫病研究所 |
| 基金项目： | 广东省科学技术团队项目，广东省自然基金资助 (0 1 2 349) |
| 摘 要： | 目的 构建华支睾吸虫cDNA表达文库 ,为筛选特异诊断抗原和疫苗候选抗原奠定基础。 方法 提取华支睾吸虫总RNA ;用Clontech公司SMARTTMcDNA文库构建试剂盒操作方法 ,进行反转录合成双链cDNA ;PCR产物纯化后 ,进行SfiI酶切 ;用ChromaSpin 40 0柱将酶切产物进行分级分离 ,回收 0 .4～ 4kb的组分 ,并与λTriplEx2载体连接、体外蛋白包装 ,产生未扩增文库 ;检测未扩增文库滴度和重组效率后 ,进行文库的扩增 ,并测定扩增文库的滴度及鉴定。 结果 未扩增文库滴度达 7.5× 10 7pfu/ml ,扩增文库滴度达 2 .7× 10 8pfu/ml ;用载体两端的引物进行PCR鉴定 ,显示 :所选噬菌体中均含有重组的cDNA ,大小在 5 0 0bp以上。 结论 已成功地获得一高质量的华支睾吸虫cD NA表达文库 |
| 关 键 词： | 华支睾吸虫 cDNA表达文库 构建 |
| 文章编号： | 1009-9727(2003)03-0282-03 |
| 修稿时间： | 2002-11-23 |
Construction and identification of a cDNA expression library from Clonorchis sinensis |
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| CHEN Shou-yi,YU Xin-bing,XU Jin,et al.. Construction and identification of a cDNA expression library from Clonorchis sinensis[J]. China Tropical Medicine, 2003, 3(3): 282-284 | |
| Authors: | CHEN Shou-yi YU Xin-bing XU Jin et al. |
| Affiliation: | CHEN Shou-yi,YU Xin-bing,XU Jin,et al.Dept of Pathogenic Biology of Zhongshan University Medical College,Guangzhou 510089,Guangdong,P.R.China. |
| Abstract: | |
| Keywords: | Clonorchis sinensis cDNA expression library Construction. |
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