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腺相关病毒载体pAGX(+)的构建
引用本文:史耕先,刘音,赵方萄,朱立平.腺相关病毒载体pAGX(+)的构建[J].中华微生物学和免疫学杂志,2001,21(5):547-551.
作者姓名:史耕先  刘音  赵方萄  朱立平
作者单位:中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫学系,
基金项目:国家自然科学基金资助项目(39630300);中国医学科学院创新项目
摘    要:目的构建腺相关病毒(AAV)载体并进行鉴定,以介导真核细胞的基因传递和表达.方法以基因重组技术构建AAV载体,用Southern杂交、狭缝杂交以及激光共聚焦显微镜等鉴定构建的AAV载体.结果成功地获得了重组AAV表达载体pAGX(+),藉报告基因EYFP鉴定pAGX(+),见pAEYFP经包装的重组AAV储存液的感染滴度达1.39×107TU(transmissionunit)/ml、复制滴度达1.94×1011颗粒/ml.Southern杂交表明EYFP基因获得成功拯救.rAAV/EYFP颗粒成功转导COS7细胞,EYFP获得表达,并整合入COS7细胞基因组,而藉质粒载体pEYFPCMV介导的转移,EYFP未能整合.结论成功地构建了一个AAV载体,并成功地介导了基因的转移、表达和整合.

关 键 词:腺相关病毒载体  黄色荧光素蛋白EYFP  基因转移  基因表达
修稿时间:2000年1月26日

Construction of an adeno-associated virus vector pAGX(+)
SHI Gengxian,LIU Yin,ZHAO Fangtao,et al..Construction of an adeno-associated virus vector pAGX(+)[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2001,21(5):547-551.
Authors:SHI Gengxian  LIU Yin  ZHAO Fangtao  
Institution:SHI Gengxian,LIU Yin,ZHAO Fangtao,et al. Department of Immunology,Institute of Basic Medical Sciences,Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College,Beijing 100005,P. R. China
Abstract:
Keywords:Adeno  associated virus vector  Reporter gene EYFP  Gene transfer  Gene expression
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