低氧对人成熟树突状细胞MMP9/TIMP1及CCR7 表达的影响

目的： 观察低氧对人单核细胞来源成熟树突状细胞（mDCs）趋化因子受体（CCR7），基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其组织抑制剂（TIMP-1）表达的影响，以期为改进DCs疫苗体内迁移能力低下提供新策略。方法： 分离制备人外周血单核细胞（PBMCs），采用体外常规培养体系 ［粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）与白细胞介素-4（IL-4）共同刺激］ 诱导DCs，于诱导后第5 d加入TNF-α促成熟，48 h后将mDCs置低氧环境下（1％ O2、5％ CO2、94％ N2）分别继续培养6 h、12 h，设常氧对照组（21% O2、5% CO2），收获细胞及培养上清；采用RT-PCR技术检测MMP-9、TIMP-1及CCR7的表达；明胶酶谱法检测培养上清中MMP-9的水平与活性，流式细胞术检测mDCs表面CCR7的表达。结果： RT-PCR及酶谱实验结果显示，低氧6 h、12 h处理组mDCs MMP-9水平显著下降；与对照组比较，各低氧处理组mDCs均未检测到TIMP-1 mRNA表达的变化；转录及细胞表面表达分析结果显示，与常氧对照组比较，低氧6 h处理组趋化因子受体CCR7表达显著降低，而12 h处理组其表达显著回升至近常氧组水平。结论： 低氧下调mDCs MMP-9表达，破坏MMP-9/TIMP-1平衡，可能是DCs疫苗体内迁移能力低下的主要因素之一。趋化因子受体CCR7在mDCs对低氧应答中可能起重要作用。

Effects of hypoxia on expression of MMP9/TIMP1 and CCR7 in human monocyte-derived mature dendritic cells