抗细粒棘球蚴人工重组B抗原人源单链可变区抗体的筛选与在原核系统中的表达

目的 筛选并表达抗细粒棘球蚴人工重组B抗原（r-AgB)的人源单链可变区抗体（SCfv)。为细粒棘球蚴B抗原蛋白质功能的研究及包虫病的基因治疗开辟新途径。方法 采用噬菌体表面展示技术，以重组纯化的细粒棘球蚴B抗原为固相抗原，经过5轮“吸附-洗脱-扩增”的筛选过程，从半合成的噬菌体抗体库中获得了抗原结合活性和特异性较强的含抗r-AgB的ScFv基因片段的阳性克隆，提取质粒，经SfiⅠ/NotⅠ酶切鉴定后，亚克隆到pCANTAB5E载体上，转化大肠杆菌XL1-Blue，经IPTG诱导，表达可溶性ScFv。结果 筛选得到的ScFv片段基因为768bp，经SDS-PAGE鉴定，在大肠杆菌XL1-Blue中表达的ScFv分子质量约28ku，经过ELISA和Western-Blot检测，该单链抗体具有较强的抗原结合特性和特异性，结论 细粒棘球蚴重组B抗原人源单链可变区抗体筛选和表达成功，为今后包虫病人源抗体的研究和应用奠定了基础。