| RNA干扰抑制肝星状细胞CTGF表达对细胞外基质分泌的影响 |
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| 引用本文： | 主余华,任万华,张春清,石军,孙成刚.RNA干扰抑制肝星状细胞CTGF表达对细胞外基质分泌的影响[J].中国病理生理杂志,2008,24(11):2245-2250. |
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| 作者姓名： | 主余华 任万华 张春清 石军 孙成刚 |
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| 作者单位： | 山东大学附属省立医院消化内科,山东 济南 250021 |
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| 基金项目： | 山东省卫生厅青年基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的：利用pEGFP质粒载体构建介导结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA表达的质粒，筛选有效的抑制序列后，研究其对HSC-T6中TGF-β1、CTGF及细胞外基质表达的影响。方法:1.分别设计3对针对CTGF的有小发夹结构的两条DNA序列及1对非特异对照序列，构建重组体成功后转染HSC-T6，24 h后通过RT-PCR及Western blotting分析HSC-T6 CTGFmRNA及蛋白表达水平，筛选出有效抑制CTGF表达的序列。2.将已构建并筛选出有最高抑制效率的pEGFP-CTGFshRNA转染HSC-T6 ，培养24、48 h后用RT-PCR和/或Western blotting检测各组细胞中TGF-β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原基因的表达;放免法分析细胞上清液中Ⅲ型前胶原、IV型胶原、透明质酸和层黏连蛋白的含量。结果:将构建成功的3组pEGFP-CTGFshRNA转染肝星状细胞后，筛选出两组能高效抑制CTGF表达的序列; pEGFP-CTGFshRNA能明显抑制HSC-T6 CTGF、Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白的表达，降低上清液中Ⅲ型前胶原、IV型胶原、透明质酸和层黏连蛋白的含量(P<0.01或P<0.05)，而对TGF-β1的基因表达则无影响。结论:pEGFP-CTGFshRNA能高效抑制肝星状细胞中CTGF及细胞外基质的表达;CTGFshRNA介导的RNA干扰有望对慢性肝病所致肝纤维化具有治疗潜力。
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| 关 键 词： | RNA干扰 短发夹RNA 结缔组织生长因子 肝星状细胞 转化生长因子β 细胞外基质 |
| 收稿时间： | 2007-09-07 |
Effect of plasmid delivered shRNA knocking down CTGF on extracellular matrix secretion in rat hepatic stellate cells |
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| ZHU Yu-hua,REN Wan-hua,ZHANG Chun-qing,SHI Jun,SUN Cheng-gang.Effect of plasmid delivered shRNA knocking down CTGF on extracellular matrix secretion in rat hepatic stellate cells[J].Chinese Journal of Pathophysiology,2008,24(11):2245-2250. |
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| Authors: | ZHU Yu-hua REN Wan-hua ZHANG Chun-qing SHI Jun SUN Cheng-gang |
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| Institution: | Department of Gastroenterology, Provincial Hospital Affiliated to Shandong University, Jinan 250021, China. E-mail:zyh6698@yahoo.com.cn |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNA interference Short hairpin RNA Connective tissue growth factor Hepatic stellate cells Transforming growth factor beta Extracellular matrix |
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