| 重组流感血凝素三聚体蛋白疫苗的制备及免疫原性评价题录 |
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| 引用本文： | 张国梅,刘京,马宁,周蓉,乐洋,张哲罡,年悬悬,李雪丹,张家友,张阳洋,李盛,黄虎,杨晓明.重组流感血凝素三聚体蛋白疫苗的制备及免疫原性评价题录[J].中华微生物学和免疫学杂志,2023(2). |
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| 作者姓名： | 张国梅 刘京 马宁 周蓉 乐洋 张哲罡 年悬悬 李雪丹 张家友 张阳洋 李盛 黄虎 杨晓明 |
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| 作者单位： | 1. 武汉生物制品研究所有限责任公司病毒性疫苗研究二室;2. 湖北葛店人福药用辅料有限公司技术研发中心 |
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| 摘 要： | 目的制备重组流感病毒血凝素(hemagglutinin, HA)三聚体蛋白疫苗并进行相关表征分析, 研究重组HA三聚体在小鼠模型中的免疫原性。方法构建稳定表达HA三聚体蛋白的CHO细胞株, 通过Western blot、单向免疫扩散试验、蛋白质粒径检测和N-糖基化位点分析对重组蛋白进行定性及定量分析。根据剂量、佐剂等处理条件的不同将BALB/c小鼠分为11个组, 并进行一致的免疫程序。初次免疫后56 d检测血清中和抗体效价, 以评价免疫原性。结果构建的CHO细胞株能够分泌表达HA三聚体。HA三聚体具备生物学活性能够在单向琼脂免疫扩散试验中形成沉淀环, 蛋白质粒径大小约为18.79 nm, 具有10个N-糖基化位点, 包括高甘露糖型、复合糖型和杂合糖型;HA三聚体重组蛋白疫苗在2次免疫小鼠后, 3.75 μg剂量配伍RFH01佐剂与对照组单价疫苗原液15 μg引起的中和抗体效价差异无统计学意义(P=0.431 2, U=36), 配伍佐剂组免疫后血清抗体效价均高于未加佐剂组, 其中15 μg HA三聚体+RFH01组效价最高, 为1 280。结论成功制备了流感病毒重组HA三聚体蛋白, 其...
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| 关 键 词： | 流感病毒 基因工程疫苗 重组亚单位疫苗 血凝素 三聚体蛋白 |
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