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铁皮石斛的PCR-RFLP鉴别方法
引用本文:王孟颖,万林春,赵雯,饶毅,曾黎明.铁皮石斛的PCR-RFLP鉴别方法[J].药物分析杂志,2023(3):509-515.
作者姓名:王孟颖  万林春  赵雯  饶毅  曾黎明
作者单位:1. 江西中医药大学;2. 江西省药品检验检测研究院国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心;3. 江西农业大学生物科学与工程学院
摘    要:目的:建立铁皮石斛专有的分子鉴别方法。方法:通过对铁皮石斛及其近缘种石斛的叶绿体matk基因序列进行对比分析,根据鉴别位点设计特异的铁皮石斛鉴别引物,通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)技术进行鉴别。结果:本试验中鉴别引物可成功扩增铁皮石斛及其近缘种石斛,PCR产物为331 bp,铁皮石斛的PCR产物可被Tru9 Ⅰ限制性内切酶切开,而近缘种石斛不能被切开,可通过琼脂糖凝胶电泳成功鉴别。结论:本试验建立的PCR-RFLP鉴别方法可以鉴别铁皮石斛及其近缘种石斛。

关 键 词:铁皮石斛  PCR-RFLP法  分子鉴别  matk基因  近缘物种
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