| 摘 要： | 目的建立H5N1假病毒的体内感染模型, 并对抗体FHA3的体内中和活性进行鉴定。方法依据A/Anhui/1/2005/H5N1毒株血凝素(hemagglutinin, HA)和神经氨酸酶(neuraminidase, NA)的序列信息, 构建重组表达质粒pcDNA3.1-HA5和pcDNA3.1-NA1, 并与质粒pNL4-3.Luc.R-E-共转染293T细胞制备H5N1假病毒上清, 电镜观察上清中假病毒颗粒形态。假病毒上清感染MDCK细胞后, 测定病毒滴度;经腹腔注射入BALB/c小鼠体内, 在感染后2、5、8、12 d进行生物发光成像, 检测假病毒体内感染情况。利用建立的小鼠感染模型, 评价抗体FHA3的体内功能活性。结果重组表达质粒pcDNA3.1-HA5和pcDNA3.1-NA1构建正确, 与pNL4-3.Luc.R-E-质粒共转染293T细胞可制备出高滴度的假病毒上清, 电镜下可见圆形的病毒颗粒。H5N1假病毒感染后, 小鼠体内发出较强的荧光, 而攻毒前给予抗体FHA3处理可减弱其荧光信号。结论成功构建出H5N1假病毒体内感染模型, 并证实抗体FHA3对假病毒的感染具有体内...
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