α-GalCer诱导急性肝损伤时肝内Kupffer细胞表型和功能的变化

背景:Kupffer细胞是肝内重要的免疫细胞,在天然免疫和适应性免疫中起重要作用。目的:研究α-GalCer诱导的急性肝损伤中肝内Kupffer细胞表型和功能变化。方法:将30只小鼠分为模型组和对照组,腹腔注射α-GalCer诱导小鼠急性肝损伤。行肝组织病理学检查,免疫组化法检测肝内F4/80阳性的Kupffer细胞的分布。胶原酶原位灌注、不连续密度梯度离心和选择性贴壁法分离正常和急性肝损伤小鼠的Kupffer细胞。real time-PCR法检测肝组织和Kupffer细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α、于扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-10和Toll样受体(TLR)4mRNA表达。采用全自动生化仪测定血清ALT和AST水平。结果:α-GalCer腹腔注射引起小鼠局灶性肝细胞坏死、炎性细胞聚集,血清ALT、AST明显升高(P<0.05)。免疫组化法发现肝内F4/80阳性细胞明显增加、体积增大,并在肝组织炎症坏死处呈灶性聚集。胶原酶原位灌注分离的Kupffer细胞数量明显增加(P<0.01),肝组织和Kupffer细胞TNF-α、IFN-γ和IL-10 mRNA表达明显增加(P<0.05),而Kupffer细胞中TLR4 mRNA表达显著下降(P<0.05)。结论:在急性肝损伤中Kupffer细胞的抗炎因子IL-10表达增加和TLR4途径下调可能是Kupffer细胞维持机体免疫耐受、避免过度炎症的重要机制。