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| RNA 结合蛋白 QKI 吸附海绵载体的构建及其对肝癌细胞增殖的影响 | |
| 引用本文： | 韦梦影,叶子晨,卢兹凡,卢晓昭. RNA 结合蛋白 QKI 吸附海绵载体的构建及其对肝癌细胞增殖的影响[J]. 医学分子生物学杂志, 2015, 0(2) |
| 作者姓名： | 韦梦影 叶子晨 卢兹凡 卢晓昭 |
| 作者单位： | 1. 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室 西安市,710032 2. 第四军医大学药学院药物基因组学教研室 西安市,710032 3. 中国人民解放军第 323 医院 西安市,710054 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.31270843)This work was supported by a grant from the National Natural Science Foundation of China |
| 摘 要： | 目的：构建针对 RNA 结合蛋白 quaking (QKI)的特异性吸附海绵载体(QRE-sponge),验证其对肝癌细胞系 HepG2中内源性 QKI 分子的抑制作用。方法利用人源 QKI 的特异性识别效应原件(qua-king responsive element, QRE)序列,重复13个拷贝,串联克隆至 pEGFP-C2真核表达载体中,转染 HepG2肝癌细胞及293 T 细胞。通过 Real time PCR,双荧光素酶报告基因检测及 MTT 实验进一步验证该吸附海绵的效果及其对肝癌细胞系 HepG2增殖的影响。结果 pEGFP-C2-QRE-SP 载体经测序证实构建成功,可以成功的在 HepG2细胞中表达,其绿色荧光呈阳性,且转染24 h 后显著影响 HepG2细胞中 QKI 下游靶基因的表达(P ﹤0.05)。双荧光素酶报告基因系统显示, pGL3-QRE-SP 载体可以显著抑制外源性 QKI 的活性(P﹤0.05)。 MTT 结果显示 pEGFP-C2-QRE-SP 载体促进 HepG2细胞的增殖。结论 QKI 吸附海绵载体策略构建的 pEGFP-C2-QRE-SP 载体可以成功的诱骗吸附 QKI,并促进肝癌细胞系 HepG2增殖,为进一步研究 QKI的功能研究提供了良好工具。 |
| 关 键 词： | RNA 结合蛋白 quaking 吸附海绵载体 肝癌细胞 |
Construction of the Sponge Adsorption Vector of RNA Binding Pro-tein QKI and Its Inhibition Effect on the Proliferation of HepG2 Cells |
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| WEI Mengying,YE Zichen,LU Zifan,LU Xiaozhao. Construction of the Sponge Adsorption Vector of RNA Binding Pro-tein QKI and Its Inhibition Effect on the Proliferation of HepG2 Cells[J]. Journal of Medical Molecular Biology, 2015, 0(2) | |
| Authors: | WEI Mengying YE Zichen LU Zifan LU Xiaozhao |
| Abstract: | |
| Keywords: | quaking sponge adsorption vector hepatocellular carcinoma cell |
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