RUNX3基因真核表达载体的构建及其在乳腺癌T47D细胞中的表达 |
| |
引用本文: | 姜影,杜金荣,佟丹丹,娄阁,吴丽华,石岩.RUNX3基因真核表达载体的构建及其在乳腺癌T47D细胞中的表达[J].陕西肿瘤医学,2011(9):1720-1723. |
| |
作者姓名: | 姜影 杜金荣 佟丹丹 娄阁 吴丽华 石岩 |
| |
作者单位: | [1]哈尔滨医科大学附属第二医院病理科,黑龙江哈尔滨150086 [2]哈尔滨医科大学基础医学院病理学教研室,黑龙江哈尔滨150086 |
| |
基金项目: | 黑龙江省教育厅课题基金资助项目(编号:11521080) |
| |
摘 要: | 目的:构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-RUNX3,并在乳腺癌T47D细胞株中表达。方法:应用基因重组技术和限制性内切酶EcoRI和XhoI酶切,构建并鉴定pcDNA3.1(+)-RUNX3真核表达载体,经脂质体Lipofectamine2000介导质粒转染T47D细胞后应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot实验,检测RUNX3在T47D细胞中的表达。结果:重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-RUNX3经限制性内切酶EcoRI和XhoI酶切,电泳后显示1.3kb的RUNX3目的片段和5.4kb的pcDNA3.1(+)载体片段。测序证实酶切片段与gene bank中登记的RUNX3序列相同,证实pcDNA3.1(+)-RUNX3真核表达载体构建成功。经RT-PCR和Western blot检测,表明转染pcDNA3.1(+)-RUNX3的T47D细胞RUNX3阳性表达。结论:重组真核表达载体构建正确,并建立稳定表达RUNX3的T47D细胞系,从而为后续研究提供有用的细胞研究模型。
|
关 键 词: | RUNX3基因 T47D细胞 乳腺癌 |
本文献已被 维普 等数据库收录! |
|