基于“肾主骨”理论探讨金匮肾气丸调控AGEs/RANKL/NF-κB信号通路对糖尿病性骨质疏松症小鼠的影响

目的 基于“肾主骨”理论研究金匮肾气丸通过调控晚期糖基化终产物（AGEs）/核转录因子-κB（NF-κB）受体激活剂（RANKL）/NF-κB信号通路对糖尿病性骨质疏松症（DOP）小鼠的影响。方法 选取40只6周龄骨骼肌特异性胰岛素样生长因子-1受体功能缺失（MKR）小鼠，雌雄各半，高脂饲料喂养8周建立DOP模型，将造模成功的小鼠随机分成模型组、金匮肾气丸低、高剂量组（1.3、2.6 g·kg^-1）和阿仑膦酸钠组（0.01 g·kg^-1），每组10只；另取10只同龄FVB/N小鼠为正常组。各给药组分别予以相应药物灌胃，每日1次，连续4周。给药结束后，各组小鼠行空腹血糖（FBG）检测和口服糖耐量实验（OGTT）；检测小鼠肾功能和肾指数；采用苏木素-伊红（HE）和马松（Masson）染色观察肾脏组织病理学变化；免疫组化检测小鼠肾脏组织AGEs、磷酸化核转录因子-κB（p-NF-κB）和RANKL蛋白表达水平；采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾脏组织AGEs/RANKL/NF-κB信号通路相关蛋白和股骨组织中骨保护素（OPG）、Runt相关转录因子2（RUNX2）蛋白的表达。结果 与正常组比较，模型组小鼠FBG显著升高（P<0.01），骨小梁退变，骨形态参数指标异常，OGTT的曲线下面积（AUC）显著升高（P<0.01），肾脏体积增大，肾功能指标、肾指数显著升高（P<0.01），肾小球、肾小管结构紊乱，肾脏组织AGEs、RANKL表达和p-NF-κB/NF-κB值明显升高（P<0.05），股骨组织中OPG和RUNX2表达显著降低（P<0.01）；与模型组比较，金匮肾气丸各剂量组小鼠OGTT的AUC显著降低（P<0.01），组织病理分析显示，肾小球和肾小管的结构病变缓解，肾脏组织AGEs、RANKL的表达和p-NF-κB/NF-κB值明显降低（P<0.05，P<0.01），股骨组织中RUNX2和OPG表达明显升高（P<0.05，P<0.01）。结论 金匮肾气丸可通过改善肾功能，下调AGEs/RANKL/NF-κB信号通路抑制炎性反应，进而缓解DOP小鼠骨质疏松症状，起到从肾论治DOP的作用。