|
|||||
|
|
| 多基因修饰小鼠诱导多潜能干细胞分化为胰岛素分泌细胞 | |
| 引用本文： | 范向军,王雷,陆玉华,朱铭岩,钱海鑫,王志伟. 多基因修饰小鼠诱导多潜能干细胞分化为胰岛素分泌细胞[J]. 第二军医大学学报, 2013, 34(7): 700-707 |
| 作者姓名： | 范向军 王雷 陆玉华 朱铭岩 钱海鑫 王志伟 |
| 作者单位： | 1. 苏州大学附属第一医院普通外科,苏州215006;南通大学附属医院普通外科,南通226001 2. 南通大学附属医院普通外科,南通,226001 3. 苏州大学附属第一医院普通外科,苏州,215006 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(81101615, 81070656),中国博士后基金(2012M521107),江苏省自然科学基金 (BK2010276). |
| 摘 要： | 目的观测胰岛素转录关键调控因子胰腺十二指肠同源框蛋白1(PDX-1)、神经分化因子1(NeuroD1)及肌腱膜纤维肉瘤癌基因同系物A(MafA)对小鼠诱导多潜能干细胞(iPS细胞)分化为胰岛素分泌细胞的作用。方法筛选鉴定小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)重编程的iPS细胞。以重组腺病毒Ad-mPDX-1-IRES-GFP、Ad-mNeuroD1-IRES-GFP、Ad-mMafA-IRES-GFP联合感染小鼠iPS细胞,体外培养后以RT-PCR检测胰岛B细胞功能基因表达;免疫荧光检测胰岛素蛋白表达及定位;ELISA检测不同糖浓度(0、5、10、20、30、40mmol/L)下胰岛素的分泌量。结果起源于MEFs的iPS细胞能形成边缘光整的致密克隆,表达干性基因Nanog、Rex-1、SSEA-1,并能在体内外分化为三胚层组织,显示MEFs被成功地重编程为iPS细胞。Ad-PDX-1-IRES-GFP、Ad-mNeuroD-IRES-GFP、Ad-mMafA-IRES-GFP感染的小鼠iPS细胞能分化为胰岛类B细胞,RT-PCR结果显示其胰岛B细胞功能基因的表达与小鼠胰岛B细胞株MIN6相似。免疫荧光检测可见胰岛类B细胞内有胰岛素表达。ELISA检测结果显示胰岛类B细胞对不同浓度葡萄糖有较好的反应性。结论胰岛素转录关键调控因子PDX-1、NeuroD1和MafA三者能协同作用,使小鼠iPS细胞分化为具有显著胰岛素合成和分泌能力的胰岛素分泌细胞。 |
| 关 键 词： | 诱导多潜能干细胞 胰岛素分泌细胞 转录因子 细胞分化 |
| 收稿时间： | 2013-01-20 |
| 修稿时间： | 2013-05-02 |
Polygene-modified mouse induced differentiation of pluripotent stem cells into insulin-producing cells |
|
| FAN Xiang-jun,WANG Lei,LU Yu-hu,ZHU Ming-yan,QIAN Hai-xin and WANG Zhi-wei. Polygene-modified mouse induced differentiation of pluripotent stem cells into insulin-producing cells[J]. Former Academic Journal of Second Military Medical University, 2013, 34(7): 700-707 | |
| Authors: | FAN Xiang-jun WANG Lei LU Yu-hu ZHU Ming-yan QIAN Hai-xin WANG Zhi-wei |
| Affiliation: | 1. Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital of Soochow University, Suzhou 215006, Jiangsu, China2. Department of General Surgery, Affiliated Hospital of Nantong University, Nantong 226001, Jiangsu, China*Corresponding authors. |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |
| 点击此处可从《第二军医大学学报》浏览原始摘要信息 | |
| 点击此处可从《第二军医大学学报》下载全文 | |