免疫亲和柱-高效液相色谱法测定营养型固体饮品中维生素B_(12)

目的建立测定营养型固体饮料中维生素B_(12)水平的高效液相色谱测定方法。方法样品经胃蛋白酶和淀粉酶水解后,采用维生素B_(12)免疫亲和柱富集、净化,用5ml甲醇洗脱,氮气吹干定容,再经高效液相色谱法测定,色谱柱为Eclipse XDB-C_(18),流动相有体积分数为0.025%三氟乙酸水溶液和体积分数0.025%三氟乙酸乙腈溶液梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,波长为361nm测定。结果维生素B_(12)在21.0～420.0mg/L范围内线性关系良好,回归方程y=0.115x+0.024,相关系数0.9999,回收率为88.5%～94.6%,检出限为0.5ng。结论本研究方法灵敏度高,结果准确,适用于测定营养型固体饮品中维生素B_(12)的水平。