白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段的克隆及其 |
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作者姓名: | 焦健华 马磊 张东辉 |
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作者单位: | [1]南京医科大学第一附属医院消化科,江苏南京210029 [2]南京医科大学病原生物学系、江苏省现代病原生物学重点实验室,江苏南京210029 |
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基金项目: | 南京医科大学科技发展基金重点项目(No.06NMUZ005). |
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摘 要: | 目的获取白纹伊蚊β-肌动蛋白基因序列并探讨其作为基因表达内参照的作用。方法根据昆虫β-肌动蛋白核苷酸序列的高度保守区设计引物,通过PCR的方法从白纹伊蚊C6/36细胞中扩增获得白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,进一步通过RT—PCR的方法验证其在稳定转染空载体和40S核糖体蛋白S4(RPS4)基因的白纹伊蚊C6/36细胞中的表达。结果获得白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,长911bp,与其他几种蚊β-肌动蛋白基因对应序列的相似性在89%以上。在稳定转染空载体和RPS4基因的C6/36细胞中,均可稳定地扩增出目的基因。结论成功获得了白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,并且该片段完全可以用作基因表达差异分析时的内参照基因。
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关 键 词: | 白纹伊蚊 C6/36细胞 β-肌动蛋白基因 PCR RT—PCR |
文章编号: | 1673-5234(2007)06-0454-03 |
收稿时间: | 2007-01-25 |
修稿时间: | 2007-05-14 |
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