序贯处理交联—免疫共沉淀法制备肺癌干细胞伴侣分子抗原肽瘤苗的研究

摘 要：［目的］ 探索制备肺癌干细胞伴侣分子肿瘤抗原肽复合物的方法。［方法］ 采用肿瘤干细胞微球体培养分离法进行肺癌干细胞的培养与富集。选择鸦胆子油乳和125放射性碘粒子序贯处理肺癌干细胞，诱导伴侣分子抗原肽表达，同时选用普通肺癌细胞作为对照。采用交联—免疫沉淀法分离与鉴定伴侣分子抗原肽复合物制作成肺癌干细胞和普通肺癌细胞瘤苗。将肺癌干细胞与普通肺癌细胞进行荷瘤小鼠实验对比治疗效果。［结果］ 通过肺癌干细胞微球体培养分离法，成功培养出肺癌细胞微球体。结果显示鸦胆子油乳联合125放射性碘粒子可充分诱导肺癌细胞及肺癌干细胞中伴侣分子抗原肽的合成，且表达量与鸦胆子油乳的浓度成正比。肺癌细胞和肺癌干细胞中HSP70、HSP90表达与生理盐水比较，差异均有统计学意义（P<0.001）。两种细胞抑制肿瘤生长作用、延长小鼠生存期上亦均有统计学差异（P<0.05）。［结论］ 鸦胆子油乳联合125放射性碘粒子序贯处理和交联—免疫共沉淀法可充分诱导、分离与鉴定肺癌细胞及肺癌干细胞伴侣分子抗原肽的合成，肺癌干细胞较肺癌细胞更多地表达伴侣分子抗原肽，可提高肿瘤细胞的免疫原性，制作的瘤苗疗效更好，以期在防治肺癌和其复发上有较好的应用价值。

Study of Lung Cancer Stem Cells Partner Molecular Antigen Peptide Tumor Vaccine Through the Method of Sequential Processing and Crosslinking-immunprecipitation