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HeLa细胞中miRNA-214靶基因Mek3的确定
引用本文:杨作臻,陈双,栾雪晶,刘民,李欣,汤华. HeLa细胞中miRNA-214靶基因Mek3的确定[J]. 医学分子生物学杂志, 2009, 6(3). DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2009.03.013
作者姓名:杨作臻  陈双  栾雪晶  刘民  李欣  汤华
作者单位:天津医科大学基础医学院,天津市,300070;天津市生命科学中心实验室,天津市,300070
基金项目:国家自然科学基金,天津市自然科学基金重点项目 
摘    要:目的 探索miRNA-214在HeLa细胞中的与其靶基因Mek3相互作用.方法 通过miRNA靶基因预测网站寻找可能与miRNA-214相互作用的靶基因,合成miRNA-214和对照序列,将miRNA-214、对照序列、Mek3的3'非翻译区(3' UTR)以及突变的Mek3 3'UTR分别克隆到表达载体上,转染HeLa细胞,转染48 h后提取蛋白,检测绿色荧光蛋白的表达水平; HeLa细胞转染miRNA-214后,Trizol抽提RNA,通过荧光定量PCR检测Mek3 mRNA的表达水平;Western印迹检测Mek3的蛋白表达水平.经过以上实验从mRNA和蛋白水平上验证了在HeLa细胞中miRNA-214对靶基因Mek3的作用效应.结果 生物信息学方法显示miRNA-214和Mek3存在可能的结合位点.经过实验验证了miRNA-214可以下调Mek3的mRNA和蛋白水平.结论 miRNA-214可以负调节靶基因Mek3的表达.

关 键 词:miRNA-214  Mek3基因  HeLa细胞  靶基因

Interaction of miRNA-214 with its Target Gene Mek3 in HeLa Cells
YANG Zuozhen,CHEN Shuang,LUAN Xuejing,LIU Min,LI Xin,TANG Hua. Interaction of miRNA-214 with its Target Gene Mek3 in HeLa Cells[J]. Journal of Medical Molecular Biology, 2009, 6(3). DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2009.03.013
Authors:YANG Zuozhen  CHEN Shuang  LUAN Xuejing  LIU Min  LI Xin  TANG Hua
Abstract:
Keywords:miRNA-214
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