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重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4转染骨髓间充质干细胞对其成骨分化的影响
引用本文:周志林,孙军,赵宇,汪春兰.重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4转染骨髓间充质干细胞对其成骨分化的影响[J].中国神经再生研究,2010,14(49):9189-9193.
作者姓名:周志林  孙军  赵宇  汪春兰
作者单位:安徽医科大学儿科临床学院,安徽省立儿童医院骨科,安徽省合肥市 230051,安徽医科大学儿科临床学院,安徽省立儿童医院骨科,安徽省合肥市 230051,安徽医科大学第一附属医院整形外科,安徽省合肥市230022,安徽医科大学第一附属医院整形外科,安徽省合肥市230022
基金项目:安徽省自然科学基金项目(070413090)
摘    要:背景:在许多情况下,人体组织修复是多因子共同协调作用的结果,因而共表达多基因载体的构建能够满足多因子基因治疗的需要,是近年来基因治疗的新思路。 目的:观察重组pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4共表达质粒转染大鼠骨髓间充质干细胞后的表达及其对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响,为骨缺损的联合基因治疗奠定基础。 方法:使用全骨髓培养法分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞;流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表面标志抗原的表达;重组pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4共表达质粒经酶切鉴定后,在脂质体介导下将其转入大鼠骨髓间充质干细胞,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western blot检测;茜素红染色检测转染后大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化能力。 结果与结论:流式细胞仪检测显示CD90表达强阳性,CD45表达阴性;重组pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4共表达质粒成功转染至大鼠骨髓间充质干细胞中,并获得有效共表达;转染后第14天,茜素红染色阳性,能够诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,为骨缺损的联合基因治疗奠定了基础。

关 键 词:骨形态发生蛋白  血管内皮生长因子  骨髓间充质干细胞  基因表达  成骨分化能力

Expression of recombinant coexpression plasmid of pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4 in bone marrow mesenchymal stem cells and its effects on osteogenic differentiation
Zhou Zhi-lin,Sun Jun,Zhao Yu and Wang Chun-lan.Expression of recombinant coexpression plasmid of pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4 in bone marrow mesenchymal stem cells and its effects on osteogenic differentiation[J].Neural Regeneration Research,2010,14(49):9189-9193.
Authors:Zhou Zhi-lin  Sun Jun  Zhao Yu and Wang Chun-lan
Abstract:
Keywords:the Natural Science Foundation of Anhui Province  No  070413090
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