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抗前列腺癌细胞特异抗体库的构建及特异结合抗体的筛选
引用本文:田媛,秦玺,胡宝成,黄翠芬.抗前列腺癌细胞特异抗体库的构建及特异结合抗体的筛选[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2005,12(1):13-18.
作者姓名:田媛  秦玺  胡宝成  黄翠芬
作者单位:军事医学科学院生物工程研究所 北京100850 (田媛,秦玺,胡宝成),军事医学科学院生物工程研究所 北京100850(黄翠芬)
摘    要:目的: 获得前列腺癌的噬菌体呈现型单链抗体库,筛选与前列腺癌特异结合的抗体,为前列腺癌的诊断和治疗奠定基础. 方法: 用两种恶性程度较高的前列腺癌细胞PC3,DU145膜蛋白混合物免疫Balb/c小鼠.取脾脏提取总RNA,用RT-PCR分别扩增抗体重、轻链可变区基因(VH和VL), 经Linker连接形成ScFv基因片段,将ScFv基因片段与噬菌粒载体pCANTAB 5E的连接产物转化大肠杆菌TG1.用辅助噬菌体M13KO7进行超感染,获得重组噬菌体抗体.以恶性程度低的前列腺癌细胞LNCap为对照,用PC3细胞对重组噬菌体抗体库进行五轮筛选后,随机挑取克隆,经phage-ELISA筛选特异性结合PC3细胞的ScFv.结果: 用所构建的库容量为3.5×106的单链抗体库筛选特异结合抗体,得到一个与PC3细胞特异结合的噬菌体-单链抗体.结论: 本研究所构建的抗体库中可筛选到与前列腺癌细胞结合特异性较好的抗体,可用于前列腺癌的诊断和治疗中.

关 键 词:噬菌体展示  前列腺癌  单链抗体库  筛选
文章编号:1007-385X(2005)01-0013-06
修稿时间:7/5/2004 12:00:00 AM

Construction of the Antibody Library and Selection of the Antibodies Specifically Binding to the Prostate Carcinoma Cells
TIAN Yuan,QIN Xi,HU Bao-cheng,HUANG Cui-fen.Construction of the Antibody Library and Selection of the Antibodies Specifically Binding to the Prostate Carcinoma Cells[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2005,12(1):13-18.
Authors:TIAN Yuan  QIN Xi  HU Bao-cheng  HUANG Cui-fen
Abstract:
Keywords:phage display  prostate carcinoma  ScFv library  selection
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