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| 针对S基因的siRNA抑制HepG2 2.2.15细胞中HBV基因的表达 | |
| 引用本文： | 刘家云,马龙洋,李庆霞,黄红艳,温伟红,贾林涛,薛采芳,李英辉,王成济,杨安钢.针对S基因的siRNA抑制HepG2 2.2.15细胞中HBV基因的表达[J].中华微生物学和免疫学杂志,2005,25(9):701-706. |
| 作者姓名： | 刘家云 马龙洋 李庆霞 黄红艳 温伟红 贾林涛 薛采芳 李英辉 王成济 杨安钢 |
| 作者单位： | 1. 710032,西安,第四军医大学免疫学教研室 2. 710032,西安,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室 3. 710032,西安,第四军医大学病原生物学教研室 |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973)基金资助(No.2004CB518805);国家高技术研究发展计划(863)基金资助(No.2004AA217071) |
| 摘 要： | 目的 构建针对乙型肝炎病毒（HBV）S基因的siRNA（short interfering RNA）表达载体pSUPER-S1和pSUPER-S2,观察其对HepG2 2.2.15细胞中的HBV基因表达的影响.方法 设计并合成针对HBV S区基因的siRNA寡核苷酸,经退火形成双链后克隆入pSUPER载体,构建成功的siRNA表达载体与pTK-Hyg质粒共转染稳定表达HBV的HepG2 2.2.15细胞,经200μg/ml潮霉素抗性筛选,4周后获得稳定细胞克隆,对所得细胞培养上清中的HBsAg和HBeAg进行定量检测,免疫荧光染色检测细胞内抗原的表达,同时用RT-PCR检测靶基因mRNA的抑制效果.结果 成功构建了针对HBV S基因的siRNA表达载体pSUPER-S1和pSUPER-S2,两种siRNA均能明显抑制HepG2 2.2.15细胞的HBsAg和HBeAg分泌,抑制率分别为83%和78%,免疫荧光染色显示siRNA能抑制细胞内抗原的合成,RT-PCR结果证实HBV的mRNA表达降低,而无关序列的siRNA和对照则无此作用.结论 载体产生的针对HBV S基因的siRNA能稳定、高效、特异地抑制HBV基因的表达. |
| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 RNA干扰 转染 2.2.15细胞 siRNA HBV基因 HepG2 S基因 乙型肝炎病毒（HBV） 免疫荧光染色检测 RT-PCR检测 基因mRNA |
| 修稿时间： | 2004年12月16 |
Inhibitory effects of vector-based siRNA targeting S gene on hepatitis B virus gene expression in HepG2 2.2.15 cells |
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| LIU Jia-yun,MA Long-yang,LI Qing-xia,HUANG Hong-yan,WEN Wei-hong,JIA Lin-tao,XUE Cai-fang,LI Ying-hui,WANG Cheng-ji,YANG An-gang.Inhibitory effects of vector-based siRNA targeting S gene on hepatitis B virus gene expression in HepG2 2.2.15 cells[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2005,25(9):701-706. | |
| Authors: | LIU Jia-yun MA Long-yang LI Qing-xia HUANG Hong-yan WEN Wei-hong JIA Lin-tao XUE Cai-fang LI Ying-hui WANG Cheng-ji YANG An-gang |
| Abstract: | |
| Keywords: | Hepatitis B virus RNA interference Transfection |
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