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敲减SOX9基因对骨髓间充质干细胞表达的影响
引用本文:梁大川,白洁玉,杜少华,程鹏,王震,康宁,杨自权. 敲减SOX9基因对骨髓间充质干细胞表达的影响[J]. 中国骨伤, 2013, 26(9): 760-763
作者姓名:梁大川  白洁玉  杜少华  程鹏  王震  康宁  杨自权
作者单位:山西医科大学第二医院骨科 骨与软组织损伤修复山西省重点实验室, 山西 太原 030001;山西医科大学第二医院骨科 骨与软组织损伤修复山西省重点实验室, 山西 太原 030001;山西医科大学第二医院骨科 骨与软组织损伤修复山西省重点实验室, 山西 太原 030001;山西医科大学第二医院骨科 骨与软组织损伤修复山西省重点实验室, 山西 太原 030001;山西医科大学第二医院骨科 骨与软组织损伤修复山西省重点实验室, 山西 太原 030001;山西医科大学第二医院骨科 骨与软组织损伤修复山西省重点实验室, 山西 太原 030001;山西医科大学第二医院骨科 骨与软组织损伤修复山西省重点实验室, 山西 太原 030001
基金项目:国家自然科学基金资助项目(编号:30973048);国际科技合作项目(编号:2010DFA32450);国家人事部及山西省人事厅留学回国人员科技活动择优资助项目;山西省留学基金项目(编号 :107);山西省自然科学基金资助项目(编号:2010011050-6)
摘    要:目的:构建小鼠S0X9基因干扰的慢病毒载体,体外转染小鼠骨髓间充质干细胞,观察小鼠SOX9基因在小鼠间充质干细胞中的表达影响。方法:针对小鼠SOX9基因序列,设计RNA干扰靶点序列,合成含干扰序列的双链DNAoligo连入酶切后的RNA干扰载体上,构建Lenti-SOX9-siRNA-EGFP载体,鉴定扩增。利用SOX9基因沉默载体体外转染小鼠骨髓间充质细胞,利用倒置荧光显微镜观察转染是否成功,并通过流式细胞仪测定转染效率。同时利用RT-PCR和Western Blot检测小鼠SOX9基因的表达。结果:成功构建了Lenti-SOX9-siRNA-EGFP,SOX9基因沉默慢病毒载体,能高效转染小鼠骨髓间充质细胞。RT-PCR和Western Blot检测显示经SOX9基因转染的小鼠骨髓间充质细胞基因表达沉默。结论:利用慢病毒结合RNA干扰技术敲减小鼠SOX9基因成功地转染小鼠骨髓间充质干细胞,且SOX9基因在小鼠骨髓间充质干细胞中发生了沉默,这为SOX9修复软骨损伤的进一步研究奠定了基础。

关 键 词:SOX9  慢病毒属  转染  骨髓间充质干细胞细胞
收稿时间:2012-12-18

Gene expression of bone mesenehymal stem cells transduced by the lentiviral vector of SOX9 gene knockdown
LIANG Da-chuan,BAI Jie-yu,DU Shao-hu,CHENG Peng,WANG Zhen,KANG Ning and YANG Zi-quan. Gene expression of bone mesenehymal stem cells transduced by the lentiviral vector of SOX9 gene knockdown[J]. China journal of orthopaedics and traumatology, 2013, 26(9): 760-763
Authors:LIANG Da-chuan  BAI Jie-yu  DU Shao-hu  CHENG Peng  WANG Zhen  KANG Ning  YANG Zi-quan
Affiliation:Department of Orthopaedics, the Second Hospital Affiliated to Shanxi Medical Univeristy, Taiyuan 030001, Shanxi, China;Department of Orthopaedics, the Second Hospital Affiliated to Shanxi Medical Univeristy, Taiyuan 030001, Shanxi, China;Department of Orthopaedics, the Second Hospital Affiliated to Shanxi Medical Univeristy, Taiyuan 030001, Shanxi, China;Department of Orthopaedics, the Second Hospital Affiliated to Shanxi Medical Univeristy, Taiyuan 030001, Shanxi, China;Department of Orthopaedics, the Second Hospital Affiliated to Shanxi Medical Univeristy, Taiyuan 030001, Shanxi, China;Department of Orthopaedics, the Second Hospital Affiliated to Shanxi Medical Univeristy, Taiyuan 030001, Shanxi, China;Department of Orthopaedics, the Second Hospital Affiliated to Shanxi Medical Univeristy, Taiyuan 030001, Shanxi, China
Abstract:
Keywords:SOX9  Lentivirus  Transfection  Bone mesenehymal stem cells
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