| 人类疱疹病毒8型实时荧光定量PCR外标准品的构建 |
| |
| 引用本文： | 郭建,石岩,普雄明. 人类疱疹病毒8型实时荧光定量PCR外标准品的构建[J]. 山东医药, 2013, 53(15): 1-3 |
| |
| 作者姓名： | 郭建 石岩 普雄明 |
| |
| 作者单位： | 1. 石河子大学医学院,新疆石河子832000;新疆维吾尔自治区人民医院
2. 新疆维吾尔自治区人民医院 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
| |
| 摘 要： | 目的构建人类疱疹病毒8型(HHV-8)基因质粒标准品,以便快速、灵敏、可靠地检测与HHV-8相关疾病患者的病毒载量。方法提取HHV-8基因组DNA,以HHV-8 ORF26为目的基因设计引物,进行PCR扩增;纯化目的片段与pMD19-T Vector连接并转化到大肠杆菌中;提取重组质粒DNA,并行PCR、测序鉴定,计算重组质粒原液拷贝数浓度并制备梯度浓度标准品,实时荧光定量PCR(Real-time FQ-PCR)构建标准曲线。结果 HHV-8ORF26目的片段制备成功,获得稳定的重组质粒,保证了目的片段的特异性和序列完整性,标准曲线参数良好,外标准品阈值循环数(Ct)与其相应梯度稀释浓度呈良好的线性关系,扩增效率高。结论成功构建了HHV-8的Real-time FQ-PCR外标准品,可以快速检测样品中的HHV-8载量。
|
| 关 键 词： | 人类疱疹病毒 人类疱疹病毒8型基因 质粒标准品 实时荧光定量PCR 卡波西肉瘤 |
Construction of external standard for detection of human herpesvirus 8 using the real-time fluorescent quantitative PCR |
| |
| GUO jian , SHI Yan , PU Xiong-ming. Construction of external standard for detection of human herpesvirus 8 using the real-time fluorescent quantitative PCR[J]. Shandong Medical Journal, 2013, 53(15): 1-3 |
| |
| Authors: | GUO jian SHI Yan PU Xiong-ming |
| |
| Affiliation: | 1 Medical college of Shihezi University,Shihezi 832000,P.R.China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
