老龄与幼年犬体外冠状血管环对17β-雌二醇作用敏感性的比较

目的:观察17β-雌二醇对幼年犬和老龄犬的冠状动脉收缩作用的影响。方法:实验于2005-08/12在甘肃省心血管病研究所完成。①取雄性杂交幼年家犬(犬龄<1岁)和老龄家犬(犬龄>8岁)心脏。②血管环温育平衡后,向浴槽中累积加入KCl5～50mmol/L,建立量效曲线。用K-H液反复冲洗平衡后,并加入30μmol/L17β-雌二醇温育20min后,重新建立KCl量效曲线。血管环在无Ca2 K-H液中温育30min,先加入80mmol/LKCl,打开电压依赖性钙通道,10min后,加入累积浓度为1×10-5,3.16×10-5,1×10-4,3.16×10-4,1×10-3,3.16×10-3和1×10-2mol/L的CaCl2,观察30μmol/L17β-雌二醇对CaCl2量效曲线的影响。③血管环稳定后,向浴槽中加入50mmol/LKCl,待血管环收缩张力达峰值后,用K-H液冲洗。20min换液一次,平衡30min后重复上述实验,待血管环张力达高峰并稳定后,分别加入17β-雌二醇,累积浓度分别为1,4,8,40和80μmol/L,观察血管环张力变化。观察去除内皮细胞后,17β-雌二醇在这2种血管环上舒血管作用的变化。比较17β-雌二醇对KCl50mmol/L预收缩在这两种血管平滑肌上的舒张作用的差异,并随时记录张力的变化值。④用线性回归法计算17β-雌二醇使激动剂效应降低50%时所采用的拮抗剂的浓度。计算量效曲线实验中KCl和CaCl2的激动剂产生其50%最大效应所需摩尔浓度的负对数值。结果:①5～50mmol/LKCl可诱发冠状动脉血管环产生明显的量效收缩作用。加入累积浓度为3.16×10-5～1×10-2mol/L的CaCl2后,动脉环产生明显的剂量依赖性收缩(尤其是3.16×10-4～1×10-2mol/L)。17β-雌二醇(30μmol/L)分别使KCl,CaCl2量效曲线明显右移,使血管环对KCl和CaCl22种血管激动剂的敏感性和最大收缩反应明显降低(P<0.05～0.01),且降低程度存在明显差异(P<0.01)。②17β-雌二醇均可使50mmol/LKCl预收缩冠状动脉血管环产生剂量依赖性舒张作用,幼年犬和老龄犬使激动剂效应降低50%时所采用的拮抗剂的浓度值分别为(16.37±5.19)μmol/L和(28.47±8.26)μmol/L,差异明显(P<0.01)。去除内皮细胞后,17β-雌二醇对50mmol/LKCl预收缩动脉血管环产生的舒张作用有明显改变(P<0.05～0.01),但老龄犬内皮细胞的舒张份额远大于幼年犬,分别为36%和22%(P<0.01)。结论:老龄犬冠状动脉血管环对雌激素的敏感性远低于幼年犬,电压依赖性钙通道明显老化。

Difference in the sensitivity of in vitro coronary arteries ring to 17 beta-estradiol between aged and juvenile dogs