不同方法提取的肿瘤抗原对小鼠CTL的体外激活效应的比较 |
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引用本文: | 夏凤琴,董永兰,陈军,刘玉侠,张健,石虹.不同方法提取的肿瘤抗原对小鼠CTL的体外激活效应的比较[J].中华临床医药杂志(北京),2004,5(1):22-24. |
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作者姓名: | 夏凤琴 董永兰 陈军 刘玉侠 张健 石虹 |
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作者单位: | 吉林省肿瘤防治研究所,吉林长春130012 |
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摘 要: | 目的 梯度高渗法,弱酸洗脱法,43℃加热处理等方法提取小鼠HepA22肝癌细胞抗原,用以致敏小鼠脾细胞,观察其对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的体外激活效应。方法①梯度高渗法,即2.7%NaCl,1.8%NaCl和蒸馏水3次低温高速离心,收集上清提取。②弱酸洗脱,以pH3.3的枸橼酸—磷酸盐缓冲液室温下处理HepA-22细胞5min,低速离心,收获上清。③43℃加热处理,将HepA-22细胞置于43℃.恒温水浴16h。④用提取的抗原致敏小鼠脾细胞,MTT法检测其体外CTL杀伤活性。结果 ①相同抗原浓度,不同条件或不同提取方法所获得的抗原对小鼠脾细胞CTL杀伤能力的激活作用不相同。②经过43℃处理后提取的抗原比未经加热处理提取的抗原作用大。③弱酸洗脱提取的膜抗原作用最明显。④去掉膜抗原后再提取的蛋白激活作用最小。⑤同种提取方法不同浓度抗原作用不同,随着浓度增高,CTL活性增强。结论 ①43℃加热处理可以诱导HepA-22细胞产生HSP-抗原肽复合物,增加其对小鼠CTL活性激活作用。②弱酸可以洗脱肿瘤细胞表面的I类抗原肽,该多肽致敏的小鼠脾细胞可以有效地诱导特异性抗肿瘤免疫功能。
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关 键 词: | 肝癌 梯度高渗法 弱酸洗脱法 43℃加热处理 细胞毒性T淋巴细胞 肿瘤微环境 |
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